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小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒

发布日期:2020-08-14 14:37:44

     小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒操作步骤:



标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液

50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然

后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,

混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从

第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃

掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240U/L,160U/L,80U/L,40U/L,20U/L)。

加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先

加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃

动混匀。

温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

温育:操作同3。

洗涤:操作同5。

显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  

      小鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒注意事项:


试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间建议控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使

用排枪加样。

请每次测定的同时做标准曲线,建议做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品

稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。

封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

底物请避光保存。

严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.


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