产品描述：

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

商品属性：

产品名称	规格	货号
全血基因组 DNA 快速提取试剂盒	100 次	P-PR1027
全血基因组 DNA 快速提取试剂盒	100 次×2	P-PR1027

 

保存条件：本试剂盒在室温（15-25℃）储存 12 个月不影响使用效果。RNaseA建议-20℃长期保存。
产品介绍：
独特的结合液/蛋白酶 K 迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组 DNA 从硅基质膜上洗脱。
产品特点：
1.简单快速:1 h 内即可获得超纯的基因组 DNA。
2.超纯:获得的DNA 纯度高,可直接用于 PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
注意事项: 1.结合液CB 或者抑制物去除液 IR 低温时可能出现析出和沉淀，可以在 37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

2.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3.不同样品尤其疾病样品中白细胞数量差异可能非常大，因此产量的个体差异也可能非常大。
4.开始实验前将需要的水浴先预热到 70℃备用。
5.为了最佳效果，最好使用新鲜血液标本或者 4℃存放少于 3 天的标本，不要使用反复冻融超过 3 次的标本，否则会严重降低产量。
6.洗脱液EB 不含有螯合剂 EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批 pH 大于 7.5，pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱 DNA应该保存在－20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用 TE 缓冲液洗脱（10mMTris-HCl， 1mM EDTA，pH 8.0），但是 EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
自备试剂：无水乙醇、异丙醇
操作步骤：
提示：第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1.处理血液材料（本产品适用于处理已添加抗凝剂的 100μl-1ml 血液样品）; a.当血液样品体积小于 200μl 时,可加缓冲液 BB 补足至 200μl，再进行下一步实
验（如血液样品体积为 200μl，可直接进行下一步实验，不需加入 BB）
b.当血液样品体积超过 200μl 时,需用裂解液 RBC 处理,具体步骤如下：
在样品中加入 1-3 倍体积的裂解液 RBC，颠倒混匀，室温放置 10min，1,2000rpm 离心 20sec，吸去上清，留下细胞核沉淀（如果裂解不彻底，可以重复以上步骤一次），向离心收集到的细胞核沉淀中加 200μl 缓冲液 BB，振荡至彻底混匀。
c.如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类活更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量 5-20μl，可加缓冲液 BB 补足 200μl 后进行下面裂解步骤。
注意：如果需要去除 RNA，可加入 4μl RNaseA（10mg/ml）溶液，振荡 15sec，室温放置 5min。
2.加入 20μl 蛋白酶 K (20mg/ml)溶液，充分混匀，再加入 200μl 结合液 CB,立刻涡旋振荡充分混匀,在 70℃放置 10min,直到溶液变清亮。
3.冷却后加入 200μl 无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。
4.将上一步混合物（包括可能有的沉淀）加入一个吸附柱AC 中，（吸附柱放入收集管中）12,000 rpm 离心 30-60sec，倒掉收集管中的废液。
5.加入 500μl 抑制物去除液 IR, 12,000 rpm 离心 30sec，弃废液。
6.加入 500μl 漂洗液 WB（请先检查是否已加入无水乙醇!）, 12,000 rpm 离心30sec, 弃掉废液。
7.重复操作步骤 6
8.将吸附柱AC 放回空收集管中, 12,000 rpm 离心 2min，将吸附柱置于室温放置数分钟, 以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
9.取出吸附柱 AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加 60-100μl洗脱缓冲液 EB（洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中预热效果更好），室温放置 2min，12,000 rpm 离心 2min。为增加基因组 DNA 的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱 AC 中，室温放置 2 min，12,000 rpm 离心 2 min。
（注意：若用 ddH2O 做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内，pH 值低于 7.0会降低洗脱效率；且 DNA 产物应保存 在-20℃，以防 DNA 降解）