土壤有效硼试剂盒说明书
微量法100T/96S
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
土壤中有效硼直接影响着植物的吸收和利用。
测定原理：
硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物，在420nm有特征吸收峰。
自备仪器和样品：
天平、常温离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
试剂组成和配制
试剂一：液体5mL×1支，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加8mL蒸馏水溶解，加0.125mL乙酸。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加4mL蒸馏水溶解。
样本处理
新鲜土样风干，过100目筛，按照土壤质量（g）：蒸馏水体积（mL）为1：2的比例（建议称取约0.5g土样，加入1mL蒸馏水）加入蒸馏水，沸水中浸提10min，待自然冷却，加入50μL试剂一，震荡5min，8000g ，25℃离心10min，取上清液待测。
测定操作表
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空白管
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测定管
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样本（μL）
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40
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试剂二（μL）
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80
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80
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试剂三（μL）
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40
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40
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H2O（μL）
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80
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40
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充分混匀，25℃黑暗中静置1h
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于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定420nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管
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计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.3897x - 0.021，R² = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.021）÷ 0.3897÷（W÷V样总）
= 2.56×（△A+0.021）÷W
V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.1949x - 0.021，R² = 0.9995
有效硼含量（mg/kg）=（△A+0.021）÷ 0.1949÷（W÷V样总）
=5.13×（△A+0.021）÷W
V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
土壤有效硼试剂盒说明书注意事项
1. 配制好的试剂二4℃保存不可超过7天。
2. 显色时严格控制温度并且避光，以免显色剂见光分解。
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