公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！
商品属性：
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产品名称 |
规格 |
货号 |
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单体亲和素磁珠 |
1ml（10mg/ml） |
P-PR1059 |
产品介绍：
产品特点：
·快捷，简单的一步法高通量操作;无需纯化柱或过滤器，或重复移液、离心等操作
（图1）
·极高的结合能力，在温和的条件下洗脱结合的生物素化分子
·在温和的洗脱条件下纯化生物素化样品
·极小的非特异性结合
·对样本体积要求低，便于自动化操作
·成本低：只有市场同类产品磁珠价格的一半
·磁珠至少可以重复使用5次
缓冲液
·1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸钠, 0.15 M 氯化钠; pH 7 ) ·1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8) ·1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物素溶于 PBS)
磁力分离器（适用于手动操作）：根据实验时生物样品的体积，使用者可以选择以下不同型号的磁力分离器： 8 孔磁力架可以容纳 8 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管 ; 24
孔磁力架可以容纳 24 个单独的 1.5-2.0 ml 离心管; 4 孔磁力-15 可以容纳 4 个单独的15ml 离心管; 4 孔磁力架-50 可以容纳四个单独的 50 ml 离心管。
操作过程
操作过程中实验体积可根据需要放大或者缩小
提示：在纯化生物素化蛋白质、多肽和其他分子之前。用户应将试剂盒中的所有试剂温度 平衡至室温，并用双蒸馏水配制 1x 工作溶液。
1. 轻轻震动装有磁珠的试剂瓶，直到磁珠完全悬浮。将 50µl 磁珠转移到新试管中。
提示：客户应根据每个实验粗样品中生物素化分子的数量，根据经验确定最佳的磁珠
使用量。过多的磁珠会导致背景更高；磁珠使用量少会造成产量降低。我们建议纯化50μg 生物素化分子添加 50μl 完全悬浮的磁珠。
2. 将试管放在磁力分离器上1 分钟。当磁珠完全沉淀时，去除上清液。取下试管加入四倍 磁珠体积的d2H2O，充分混合。并将试管再次置于磁力分离器上1 分钟，完全去除上清 液。
3. 按照步骤2 所述方式，用四倍磁珠体积的1x PBS 缓冲液清洗磁珠。
4. 加入三倍磁珠体积的1xBlocking / Elution Buffer，通过涡旋充分混合，并在室温下培养5 分钟。将试管放在磁力分离器上1 分钟。完全去除上清液。
5. 加入六倍磁珠体积的1xRegenerationBuffer，通过涡漩充分混合，并将试管放在磁力分离 器上1 分钟。完全去除上清液。
6. 加入四倍磁珠体积的1x PBS Buffer，并按照步骤2 所述方式清洗磁珠。这些磁珠可以随时使用。
提示：必须立即使用磁珠，否则粘合能力将显著降低。
7. 向磁珠中加入含有生物素化分子的样品，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下缓慢旋转培养30-60 分钟。
8. 将试管放在磁力分离器上，保持试管留在分离器上的同时去除上清液。如步骤 2 所示， 用1x PBS 清洗磁珠，直到在280 nm 处洗脱液的吸光度接近背景水平（OD280<0.05）。
9. 加入一倍磁珠体积的Blocking/Elution Buffer，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下培养 5-10 分钟，将与磁珠结合的生物素化分子洗脱下来。
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