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1×Taq PCR MasterMix(purple)

P-PR1071
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P-PR1071-1ml 1ml ¥62.40 登录查看

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 1×Taq PCR MasterMix(purple)

 1ml

P-PR1071

 

产品介绍: 1×Taq 预混液中包括TaqDNA 聚合酶,dNTPs,染料及PCR 反应所需的缓冲液,是一种即用型PCR 扩增试剂。使用时,只需加入引物和DNA 模板即可进行PCR 扩增, 引物和模板的加入总体积可以在 1-10µl 间变动,具有很强的可调性。该PCR 预混液能节省实验时间, 避免了常规 PCR 试剂多次加样 造成的实验污染。预混液本身含有染料,扩增完成后可直接上样,进行电泳检测。

保存条件:-20℃保存,有效期一年。
产品用途:
常规PCR 扩增,菌落PCR,TA 克隆用的PCR 片段扩增,RT-PCR。
PCR 扩增体系:
1.单个样本扩增时,按右表中所列顺序添加其它成分。充分混匀后,离心数秒使反应混合物沉到管底,将反应管置于 PCR 仪中进行扩增。
2.多个样本扩增时,可以在一个离心管中混合引物和1×TaqMasterMix,然后按比例分装。例如需要 10个 50μl 体系的 PCR 扩增,每个样本的模板量需加5μl,按左表中所列的量混合引物和 1×TaqMasterMix,然后分 45μl 到每个 PCR 管中,最后一一对应加 5μl待扩增的模板 DNA。离心数秒使反应混合物沉到管底,将反应管置于 PCR 仪中进行扩增。

PCR 循环设置:


*菌落PCR 时,94℃预变性5 分钟,用于裂解细胞,失活核酸酶
*退火温度则需按其引物的Tm 值来进行调整,一般
为Tm-5
*PCR 扩增产物用于TA 克隆时,72℃延伸15 分钟为好
扩增模板:低复杂基因组模板(质粒、病毒、λ和BAC DNA 等),50 μl 体系中添加10-100 ng;高复杂基因组模板,50 μl 反应体系中,模板的使用量应在 100-500 ng;cDNA 模板的添加量不要超过PCR反应体系的1/10,50 μl PCR 反应体系中RT 产物的加入量为2-3μl,不要超 过5 μl。
结果检测:PCR 反应结束后,5-10 μl 扩增产物用含0.5 μg/ml 溴化乙锭(或合适浓度的其它 DNA 染色试剂),合适浓度的琼脂糖凝胶电泳检测,电泳完成后在紫外透射仪下观察并记录结果。

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