公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
商品属性:
产品名称
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规格
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货号
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M-MLV III Green One-Step qRT-PCT Kit (qPCR荧光定量Mix-染料法一步法通用试剂盒)
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20ul ×100rnxs
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P-PR1142
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M-MLV III Green One-Step qRT-PCT Kit (qPCR荧光定量Mix-染料法一步法通用试剂盒)
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20ul ×500rnxs
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P-PR1142
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保存:
-20°C保存,避免反复冻融。
产品描述:
该产品为2×预混液,将缓冲液与反转录酶,热启动DNA聚合酶按照最优的比例预混,确保了快速、高特异性和超灵敏的一步RT- qPCR。在同一管中进行反转录与荧光定量PCR,使用方便,仅需加入引物与模板,用H2O(RNase free)补足体系即可。
PCR Reaction Conditions(for a 20μl reaction)
*1 :引物终浓度可在0.1-1μM范围调整。
PCR cycling conditions: 以下RT-qPCR条件适用于大部分仪器。但是,对于特定仪器可以按照仪器说明改变循环条件。M-MLV III Green One-Step qRT- PCR Kit兼容三步循环或两步循环:
3-step cycling:
2-step cycling:
可参考仪器说明书选择熔解曲线进行分析。
以上条件仅供参考;条件因反应而异,可能需要优化。
建议和优化:
引物:引物的序列、浓度以及扩增子的长度对任何RT-qPCR的特异性扩增、产量和总效率都至关重要。我们强烈建议您在设计和运行RT- qPCR时考虑以下几点:
•最佳扩增子长度为80-200bp,不超过400bp
•最终引物浓度400nM适用于大多数SYBR-Green的反应,但为了确定最佳浓度,我们建议使用范围为0.1-1μM
•使用等摩尔浓度的引物
•尽可能使用跨越内含子的引物以避免基因组DNA的扩增
•模板:重要的是,RNA模板是完整的,没有DNA污染或污染抑制剂。
RT-PCR对照:检测可能影响数据可靠性的污染DNA的存在是很重要的。
可选ROX: 该试剂盒不含 ROX(5-羧基-罗丹明,琥珀酰酯),因此,如果您的仪器需要ROX,可从本公司单独购买。
仪器的兼容性:
对于使用SYBR Green荧光染料的仪器,M-MLV III Green One-Step qRT-PCR Kit 已经过优化。
这个试剂盒除了无需 ROX校正的仪器,同样适合需要ROX 的仪器,但ROX需单独购买。