公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！
商品属性：
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产品名称
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规格
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货号
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PBCV DNA连接酶
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1250U
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P-PR1330
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PBCV DNA连接酶
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5KU
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P-PR1330
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描述： PBCV DNA 连 接酶 也称为 SplintR 连接酶 或
Chorella 病毒 DNA 连接酶，它能够高效催化相邻的 DNA
核苷酸的连接，这个连接过程需要一条互补的 RNA 在两条
DNA 单链间起“夹板”或“桥梁”的固定作用。PBCV DNA 连接
酶的这种活性远远优于传统的 T4 DNA 连接酶，有助于
miRNAs 和 mRNAs，包括 SNPs 在内的研究方法的创新。
另外，在二代测序和分子诊断等众多领域中，PBCV DNA
连接酶是富集目的基因的理想选择。它具有稳定的生物活
性，对 RNA 介导固定的 DNA 底物亲和性强（米氏常数
Km = 1 nM），能够在复杂的混合物中检测到亚纳摩尔级的特
定 RNA。因此，在 RNA 检测技术中，PBCV DNA 连接酶
不失为最佳选择用酶。
储存：-20℃可保存 2 年。
10×PBCV Ligase Buffer：500 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mM
MgCl2, 25 mM DTT, 5 mM ATP.
活性定义：25°C 反应 30 分钟条件下，使 1pmol 的
DNA:RNA 杂交底物连接所需要的酶量定义为 1Unit。
反应温度及失活该酶的最佳反应温度为 25°C，可在 16-37°C 之间优化，37℃可明显提高反应的特异性；该酶在 65°C 加热 20min 即可失活。
使用方法
1. 连接反应
连接底物（1 μM） 2 μl
10×PBCV Ligase Buffer 2 μl
PBCV DNA Ligase(25 U/μl) 1 μl
灭菌水 up to 20 μl
25°C 反应 15-60min。
2. 65°C 加热 20min，使酶失活。
注意事项
1.该酶对一价阳离子非常敏感，如 NaCl 或 KCl 的浓度应低于 50 mM。
2. 该酶的反应温度为16~37°C，最佳温度为25℃。
3. 连接效率随着夹板 RNA 长度的减少而降低，当长度小于等于 10nt 时，连接效率为零。
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