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Benzonase 核酸酶

P-PR1340
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 Benzonase 核酸酶

 25KU

P-PR1340

 Benzonase 核酸酶

10000ku

P-PR1340

 

描述:Benzonase 核酸酶是来自 Serratia marcescens, 经 基因工程改进的核酸内切酶。它能降解所有形式(包括单链, 双链,线性和环状)的 DNA 和 RNA 而没有蛋白裂解活性, 在广泛条件范围具有很高的特异性。它将核酸完全消化成 3-5 碱基长度(杂交限度以下)的 5’-单磷酸寡核苷酸,最适 合从重级蛋白中去除核酸的操作,符合 FDA 关于核酸污染 的处理规程。Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使该酶 成为降低粘度以减少处理时间和增加蛋白产量的最佳选择。 该酶与BacReady-Protein Extraction Solution和RIPA Lysis Buffer 等蛋白抽提试剂配合使用,从而消除粗提物中的核酸, 降低粘度。
单位定义:在 30 分钟内使△A260 值降低 1.0(相当于完全
消化 37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。
应用
♦ 蛋白提取时去除核酸污染
♦ 2D 凝胶电泳
♦ Western Blot
♦ IP- Western
储存:置于-20°C 保存。
操作方法
1. 组织处理方法:将 30-50mg 动植物组织研磨充分后,加入 100-200 μl RIPA 裂解液,同时加入 1 μlBenzonase 核酸酶,旋涡振荡混合均匀,室温孵育 30min。
2. 细胞处理方法:将 106-107悬浮细胞液 6,000 rpm 离心10min 后,弃掉上清液,使用 100 μl RIPA 裂解液重悬细胞,同时加入 1μl Benzonase 核酸酶,旋涡振荡混合均匀,室温孵育 30min。
注意:贴壁细胞重悬于 PBS 后,处理方法同悬浮细胞。
3. 大肠杆菌细胞处理:将 500 μl E.coli 培养液 8,000rpm 离心 5min 后,弃掉上清液,使用 100 μl 大肠杆菌裂解液重悬细胞,同时加入 1μl Benzonase 核酸BCat.No..C2001 Size: 2,500 U, 25 U/μl酶,旋涡振荡混合均匀,室温孵育 30min。
4. 裂解步骤完成后,将裂解产物于 13,000 rpm 离心 10min后,取上清即为提取蛋白(包涵体蛋白留取沉淀为提取蛋白)。
5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
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