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热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)

P-PR1351
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 热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)

 100U

P-PR1351

 热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)

1000U

P-PR1351

 

描述: 热 敏 双 链 DNA 特 异 性 核 酸 酶 (Heat labile ds-DNA-specific Nuclease ,又名 ezDNase 或 HL dsDNase),为双链特异性核酸酶。其特异性的识别降解双 链 DNA,对单链 DNA 或 RNA 几乎无活性,其降解 dsDNA 的能力比 ssDNA 高~5000 倍。除此外,该酶降解双链 DNA 的能力比 bovine DNaseI 高~30 倍,因此特别适用于去除 RNA 样品中的基因组 DNA 污染。该热敏型双链 DNA 核 酸酶可将 DNA 降解为 2~8bp 的产物,且 55℃ 5min 可使 该酶不可逆失活,同时又能保持 RNA 和 ssDNA 的稳定性。 除此外,本酶适合于,对基因组样品进行酶法片段化反应。

组分

储存:-20℃ 可保存 3 年。
活性定义: 1 单位指 25°C 条件下 15min 将 10μg 基因组DNA 消化至 80%的产物<500bp,所需的酶量。
使用注意事项
(1)1×dsDNase Buffer:20mM Tris-HCl pH8, 5mM MgCl2。该酶需要 1~5mM MgCl2。
(2)该酶对 K+敏感,反应体系中推荐 K+浓度低于 40mM。
(3)通常在 RT 反应中的用量为 0.1~0.5U/20 μl 体系。
(4)任何浓度的 SDS、盐酸胍均抑制该酶活性。
(5)该酶的最佳反应温度为 25~37℃,42℃ 30min 后活性损失 70%。
使用实例 1(对基因组 DNA 进行片段化反应)
1. 按以下组分配制反应体系
基因组 DNA 10 μg
10×dsDNase Buffer 2.5 μl
HL dsDNase (2 U/μl) 0.5-1 μl
Rnase Free H2O Up to 25 μl
2. 室温 25°C 孵育 15min,55~65°C 5min 加热失活。
使用实例 2(基因组 DNA 的去除)
1. 按以下组分配制反应体系
基因组 DNA 1 μg
10×dsDNase Buffer 2.5 μl
HL dsDNase (2 U/μl) 1 μl
Rnase Free H2O Up to 25 μl
2. 室温 25°C 孵育 30min,55~65°C 5min 加热失活。此时基因组 DNA,通常 90%以上的产物被消化至<15bp。

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