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UNG (Uracil N-Glycosylase)

P-PR1353
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 UNG (Uracil N-Glycosylase)

 1000U

P-PR1353

 UNG (Uracil N-Glycosylase)

5000U

P-PR1353

 

描述:尿嘧啶 DNA 糖基酶(Uracil N-Glycosylase,UNG) 又名 Uracil-DNA Glycosylase, UDG, 来源于 E. coli uracil N-glycosylase 基因的重组表达,分子量为 26kDa。 其可催化含尿嘧啶的单链和双链 DNA 释放游离尿嘧啶。 它对 RNA 无活性,主要应用于 PCR 扩增产物的防污染。 它的作用原理基于:如果在 PCR 反应中以 dUTP 替代 dTTP掺入DNA 中,形成了含 dU 碱基的 PCR 扩增产物, 该酶能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U 基的糖苷键,降 解该 PCR 扩增产物。 

组分

活性定义:在标准 PCR 反应体系下,37℃条件下,1 小时降解 1µg 含 dU 碱基的单链 DNA 的酶量为 1 活性单位。
反应 Buffer:
UNG与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。
酶储存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, , 50%
Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
储存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反复冻融。
热失活:95°C,5min。
操作方法
1.配制反应体系
Super Taq DNA Polymerase 0.5 μl
dNTP/dUTP Mixture 2~4 μl
10XHi PCR Buffer 5 μl
Uracil N-Glycosylase (5U/μl) 0.2~0.5 μl
Primers (10μM each ) 1 μl
Template DNA 10 ng-1 μg
DEPC-treated Water up to 50 μl
2. PCR 扩增循环参数


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