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绵羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒

PS109366
Sheep Melatonin;MT ELISA Kit
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仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中绵羊褪黑素(MT)的含量。

产品名称

绵羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒

英文名称

Sheep Melatonin,MT ELISA Kit

货号

PS109366

试验原理:
绵羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。

试剂盒组成:

1

20 倍浓缩洗涤液

30ml×1 瓶

7

终止液

6ml×1 瓶

2

酶标试剂

6ml×1 瓶

8

标准品(270ng/L)

0.5ml×1 瓶

3

酶标包被板

12 ×8 条

9

标准品稀释液

1.5ml×1 瓶

4

样品稀释液

6ml×1 瓶

10

说明书

1 份

5

显色剂 A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 张

6

显色剂 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 个

样本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2400 ng/L

号标准品

150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

1200ng/L

号标准品

150µl 的 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

600ng/L 

号标准品

150µl 的 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

300ng/L

号标准品

150µl 的 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

150ng/L

号标准品

150µl 的 号标准品加入 150µl 标准品稀释液

绵羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值
大于标准品孔的第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,
计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

绵羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在第一、第二孔中分别加标
准品 100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl,混匀;然后从第一孔、第二
孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl,
混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 弃掉,再各取 50μl 分别加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各
 50μl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl,混
匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准
品稀释液 50μl,混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50μl,
浓度分别为 180ng/L,120ng/L ,60ng/L,30ng/L, 15ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样
品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混
匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 25 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 25 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。

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