事实上, 最初开始接触这个东西之际, 我根本就不清楚所谓何物叫做“完全培养基”。
彼时才初入实验室, 师兄随手丢给了我一瓶呈现粉红色的液体, 还说道“拿着去, 给细胞换液”。我就这样傻乎乎地去换了, 然而, 细胞到了第二天全部都飘起来了。过后才弄明白, 那仅仅是基础培养基罢了, 既没有添加血清, 也没有添加因子, 细胞最终被饿死了。
挺丢人的，但谁不是这么过来的。
细胞完全培养基到底是啥？
确切来讲, 那是为细胞所准备的“一日三餐”, 细胞和我们不同, 它没办法自行前往食堂去打饭, 而是你给予它什么它就吃什么。
只不过能供应最基础营养成分的基础培养基, 可类比为白米饭, 虽能使人饱腹, 然而却存在营养不够全面完备的状况。与之不同的是, 完全培养基乃是于这锅白米饭之上添加了诸如肉、蛋、菜等类似物品, 诸如血清、生长因子、抗生素以及谷氨酰胺之流的东西, 只有添加了这些, 使其齐全完备之后, 它才能够生长得良好。
不少人向我询问, 可不可以直接去购置现成的那种完全培养基呢? 是可以的, 然而价格较为昂贵。并且不同的细胞在挑食方面的程度是不一样的, 存在一些细胞比较“随和”, 不管给予什么都能接受；还有一些细胞相当“挑剔”, 只要少了哪怕一样东西, 就会以死亡来“示威”。
为什么你的细胞总是养不好？
别急着怪自己手残，很多时候是培养基的问题。
那段时期, 我养着一种肿瘤细胞, 它老是在生长进程中开启分化模式, 导致形态发生改变, 进而使得实验数据变得杂乱无章。为此, 我更换了三个不同批次的基础培养基, 然而情况依旧毫无改观。直至后来添加了某一种特定的生长因子, 局面才得以稳定下来。
细胞是极为矫情的, 它对于pH有着敏感性, 它对于渗透压有着敏感性, 它对于某些氨基酸的浓度同样有着敏感性, 完全培养基里的每一个成分都存在着其自身的道理, 并非是随意凑合出一个配方便能够加以使用的。
并且, 血清批次相互之间的差异那可是实实在在地大。相同的一个品牌产品, 不同的批号, 细胞呈现出来的状态居然能够相差出相当大的一截。而这正是众多新手特别容易忽略掉的要点。
怎么判断你的完全培养基行不行？
其实标准就一条：细胞自不自在。
你进行换液操作之后, 细胞所呈现出的形态是否正确, 细胞贴附于培养器皿壁上的牢固程度如何, 细胞的增殖速率是否处于正常状态, 细胞有没有毫无缘由地浮现出空泡以及碎片, 这些情况都在向你传达答案。
切勿仅仅盯着说明书里所呈现的配方, 须知那些统统只是参考而已, 同样地, 一模一样的配方用于培养各异的细胞, 其反应极有可能全然不一样。
我有着这样的习惯, 当拿到一瓶全新的、完整的培养基之时, 首先会用它去培养一株具有“皮实”特性的细胞, 而后进行为期一周的观察。要是它并未出现任何问题, 接下来才会将其更换到难以培养的细胞上。这就好比是运用小白鼠尝试病毒一样情况（并非真实如此用小白鼠去试毒）。
自己配还是买现成的？
这个问题其实没有标准答案。
对于自行配置而言, 其具备的优势在于灵活性高、价格低廉, 然而其存在的弊端在于, 每一次所配置的批次之间或许会产生差异, 并且耗费时间与精力。选择现成的则较为省事, 稳定性同样良好, 只是价格昂贵, 而且大概不清楚里面实际上添加了什么。
我个人所采取的做法是, 针对常规细胞, 自己去进行配置, 而对于稀有的、难以培养的细胞, 则选择购买现成的。
有一种干细胞, 它传代的时候容易上“吊”, 即便如此, 我依旧购买了某知名品牌的完全培养基, 它价格不菲, 然而每一批次的质量都很稳定, 不会因为一不留神出现失误, 就导致几个月的实验砸锅。
一些没人告诉你的小细节
培养基别反复加热，反复冻融，那个营养成分会降解得很快。
避光保存，别不当回事，有些成分见光死。
添加了抗生素, 像是双抗模样这样子的完全培养基, 其保存的时间会有所缩短, 最好是在两周之内将其用完。
血清灭活与否，看细胞需求。不是所有细胞都需要灭活血清。
这些东西没人教，都是踩坑踩出来的。
最后说一句
养细胞这件事，说难也不难，说简单也不简单。
不少情形下并非你操作所引发的问题, 而是培养基存在不合适状况。更换一种配方, 更换一个品牌, 甚至更换一个血清批号, 细胞状态或许就会全然不同了。
别一味固执强行应对, 切莫毫无依据地坚信某一意念中的“神奇配方”。每一个细胞都呈现出自身独特的禀性, 循序渐进地尝试, 终究能够 discovery 适配它的那一顿餐食。
细胞完全培养基，说到底，就是你要学会理解你的细胞。
