不清楚是哪一年, 我头一回在实验台前听闻“酶标记抗体”这五个字。那一刻就觉着, 这名字极度拗口, 一听便是那种不像人话的事物。
但后来发现，这玩意儿其实挺接地气的。
琢磨琢磨, 咱做实验之际, 最令人头疼的是啥呢? 是你分明觉着那个蛋白就在那儿, 然而你却就是瞅不见它。它仿若一个藏在暗处的小贼, 你晓得它在, 可你就是逮不着它。就在这个时候, 酶标记抗体就现身来帮忙了。
它从本质上来说, 就是一个“带有标签的侦察兵”。抗体自身是对目标有认知的, 它明晰你所要找寻的那个东西的模样, 知晓其藏匿之处。其后, 我们在这个抗体之上挂载了一种酶。这种酶具备何种功能呢? 它能够催化一个反应, 进而产生颜色或者发出光亮。如此一来, 原先无法看见的事物, 现如今能够被看见了。
这般情形好似你在夜半时分去寻觅猫咪, 猫咪是黑色的, 而你的眼睛是失明的。然而你给猫咪的脖子上戴上了一个铃铛, 随后又给它涂抹上了荧光漆。如此一来, 它一旦跑动你便能够知晓它跑到哪里去了。
老实讲, 我头一回做ELISA之际, 险些将板子给摔落了。先加入样本, 接着进行洗涤处理一次, 随后再度加入样本, 并再次予以洗涤行动……如此这般循环不止, 就好似自己正在从事洗衣服的繁杂活计。然而到了最终地步, 瞅见那一排排的孔呈现出颜色变化之时, 内心之中还是略微升起了一点激动之情。毕竟, 那可是你亲自着手获取到的“证据”。
为什么非要挂个酶上去？
我当初也曾就此问题进行询问, 难道直接运用抗体去识别不可以吗? 虽说能够这么去做, 然而你却无法知晓它是否成功识别了呀。这情形就如同你派遣了一名侦察兵外出, 可是他归来后却不向你汇报情况, 如此一来, 你便只能干着急地大眼瞪小眼了。
酶在这儿所充当的便是那个起着“回来报告”作用的角色, 它不言语, 然而它会开展工作, 它一旦开展工作, 也就是对底物进行催化时, 颜色就已然发生了变化, 有了这种颜色变化, 便产生了信号, 有了这个信号, 你就能够进行测量, 就是如此简易。
酶标抗体怎么选？这是个坑
真的, 我踩过坑, 起初贪图便宜, 买了某杂牌子的酶标抗体, 结果, 背景高得如同北京冬天的雾霾那般, 信号全被淹没在噪音之中, 啥都看不出来, 那种感觉恰似你在菜市场叫嚷你朋友的名字, 周遭全是人, 哪会有人理你。
稍后变得机灵了, 挑选之际留意几方面情况, 其一, 特异性是不是良好, 不要盲目识别；其二, 酶的活性高不高, 防止半途而废；其三, 稳定性如何, 避免放置没几天就坏掉了。价格高的固然品质优良, 然而并非越贵越好, 要依据你的实验体系来判断。
做实验的人，谁没被它折磨过
讲真的, 对于做实验这件事儿而言, 好多时候并非取决于你操作得多么娴熟, 而是在于你与试剂之间的那种默契程度。当你摸透了它的特性特点, 它就会顺从地为你发挥作用。要是你对它缺乏了解, 它就会给你制造麻烦——并非你所期望的那种情况, 而是呈现出杂乱无章、各式各样的状况来。
曾有一回, 我孵育之际未能把控好时间, 进而致使整块板子全然变蓝。那时我险些哭出来, 毕竟辛辛苦苦加样一上午, 结果全白费了。而后我便养成了一个习惯, 每次进行操作之前, 都会先在心里默默念叨三遍: 时间、温度、浓度, 每一样都绝不能疏忽大意。
酶标抗体不是万能的
纵使它极为厉害, 终究不过是个工具罢了。你必须清楚何时运用它, 何时选用其它的。比如说, 倘若你想要知晓蛋白于细胞内的位置, 那么你应采用免疫荧光, 酶标抗体未必适宜。然而, 要是你欲检测某个浓度并进行定量, 那么它对此而言简直就是量体裁衣的。
别什么活都往它身上扔，它也会累的。
一提到这儿, 我陡然间记起来, 曾有一回同事向我发问, 这物品食用之后是否会致使中毒。我询问说你为何要去吃它呢? 他声称他是出于好奇。我顿时陷入无语状态。实验室里的物品, 切勿往嘴里放置, 这属于基本的操作要求。酶标抗体就算再怎么安全, 也并非是供你用来填饱肚子的。
行, 今儿就讲到这儿。下次你投身实验之际, 要是手中攥着一管酶标抗体, 莫只一门心思琢磨如何进行加样操作, 不妨思量下它实则也颇为憋屈——它这一辈子都在那寥寥几块板子上频繁来回移动穿梭, 仅仅是为了助力你去察觉到那微乎其微的一点点信号。
