事实上, 最初在初次碰到大鼠ELISA试剂盒之际, 我的那整个人处于一种懵然混沌的状态。
不是说这东西有多复杂,而是选择太多了。
多到让人心慌。
你开启一个采购网站, 去搜“大鼠ELISA试剂盒”, 瞬间出现量多达几百个, 它们的价格处在数百到数千不等的范围, 品牌名称一个赛过一个让人觉得陌生。你这般表述说自己不清楚该挑选哪一个, 我是相信的。
真的,太正常了。
便宜的真能买吗?
我存在某位师弟, 于刚走进实验室的那个时候, 鉴于贪图价格低廉, purchase了一批格外便宜的试剂盒。
结果呢?
标准曲线歪扭得如同心电图那般, 重复孔之间的差异大得令人对人生都产生怀疑了。最终数据没办法使用, 样本全部报废了, 实验需要重新做, 花费的时间变成了两倍。
便宜,有时候是最贵的。
好好去思索一下, 你喂养那群大鼠耗费了多长时间, 进行给药操作, 开展采样工作, 处理采集的样本, 每一个步骤当中都倾注了诸多心血, 然而最终在最后一步的检测工作上节省那区区几百块钱, 这样做真的值得吗?
不值。
贵的就一定对吗?
也不是。
贵的试剂盒,不一定就适合你的样本。
确有一些进口大牌, 质量着实不错, 然而其抗体乃是针对特定物种所设计, 若将其用于大鼠的某一项特定指标检测, 或许交叉反应性欠佳, 相比一些专门针对鼠科研发的国产品牌, 灵敏度反倒更低。
我见过太多人,迷信进口,结果花了大价钱,数据却不理想。
选试剂盒,不是选贵的,是选对的。
你真正该看的是什么?
三个东西:灵敏度、特异性、重复性。
灵敏度欠缺, 低浓度样本检测不出, 呈现假阴性, 你费尽心力构建的模型, 或许只因这一环节, 无法察觉差异。
特异性欠佳, 会与别的分子产生交叉反应, 进而给出一个假阳性结果, 以至于你还误以为自己发现了什么极为惊人、震撼的新现象, 然而实际上只是试剂盒在跟你耍弄玩笑罢了。
复现性欠佳, 今日所测之结果, 与明日所测之结果并不相同, 让人根本无从知晓该去相信哪一组数据。
所以啊,别光看品牌,看说明书上的技术参数。
说明书怎么看才不晕
说实话,说明书这东西,写得好的不多。
有好多试剂盒的说明书, 满篇密密麻麻都是英文, 存在一堆专业术语, 让人看了头疼。
但有几个关键点你得抓住:
查看检测范围, 你的样本浓度大概处于何种范围, 必须处于这个检测区间里面, 否则测不准。
看灵敏度。越低越好,说明它能检测到更微量的目标分子。
观测样本的类别, 血清、血浆、组织匀浆, 不同的样本拥有不一样的要求, 千万不要买错了。
还有一点, 需查看保存条件, 有的试剂盒需要在零下二十度进行保存, 有的在四度即可, 你的冰箱是否够用, 这同样是一个实际问题。
别忽视售后支持
这事儿吧,做实验的人都懂。
你瞧, 实验在持续进行当中, 突然间状况就冒出来了, 标准曲线压根就做不出来, 而且样本稀释倍数也没办法确定, 在这样的时刻下你会去找谁?
有些品牌, 选购过后便对你不闻不问, 发送邮件三日毫无回应, 拨打电话亦无人接听。
一部分形形色色的品牌, 其技术方面的支撑处于在线状态, 任何时候都能够进行询问, 甚至于还能够协助你剖析数据究竟是何处出现了问题。
我个人的经验是,选那种有技术支撑的品牌,哪怕贵一点,也值。
因为实验出问题的时候,时间比钱更贵。
我做实验踩过的坑
说个我自己经历的事儿。
有一回进行大鼠的炎症因子检测, 检测的是IL-6以及TNF-α, 那次购买了一个并非十分熟悉的牌子。
把结果做出来之后, IL - 6的数值高到了几乎超出常理的程度, 然而TNF - α的数值却低到了几乎没办法检测出来的地步。
那时候, 我觉得是自己所构建的模型出现了状况, 大鼠的制造未达标准, 险些致使整个实验要推倒重来, 从头开始做。
后来换了一个品牌的试剂盒,重新测,数据完全正常。
出问题的地方在哪里呢? 第一个试剂盒之中的抗体, 和大鼠的IL - 6存在交叉反应, 所测出来的, 根本就不是真实的IL - 6浓度。
自那之后, 每当我更换成全新品牌的试剂盒时, 都会先行取用具备已知浓度的标准品去开展预实验, 在确认不存在问题后, 方才将样本运用其上。
别嫌麻烦,这一步能救你一命。
怎么判断一个试剂盒靠不靠谱
说实话,没有百分百靠谱的方法。
但有几个参考:
瞧一瞧文献, 这个品牌的试剂盒, 有没有被别的课题组运用过, 发表过文章。要是有的话, 那起码表明并非是三无产品。
瞧一瞧评价, 去问问同行, 向师兄师姐打听打听, 再问问实验室群里的那些人。口碑这种事物, 可比广告要真实许多呢。
查库存, 部分试剂盒下单之后需等待许久方可到货, 缘由是没有现货, 要是你实验时间紧迫, 此因素亦需予以考量。
其实吧,选试剂盒跟选对象有点像
不是最有钱的就最好,也不是长得最好看的就最合适。
得看性格匹配不匹配,生活习惯合不合得来。
最重要的是, 你的样本类型, 与这个试剂盒是不是适配, 还有检测指标, 以及实验条件。
别盲目跟风,别贪小便宜,也别盲目崇拜大牌。
理性一点,谨慎一点,多问一句,多看两眼。
如此这般, 你的实验所得数据方才能够具备可靠性, 你的论文才可以顺遂得以发表, 你的毕业才不会出现延期状况。
别问我为什么知道这些。
都是血泪换来的。