ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。ELISA实验中出现假阳性结果是一个常见的问题，可能由多种因素引起。以下是一些导致ELISA实验假阳性的主要原因：
1. 内源性因素：
年龄因素：老年人由于免疫功能异常，可能产生异常蛋白质，干扰检测结果。
疾病因素：某些疾病如类风湿关节炎、红斑狼疮、糖尿病、自身免疫性疾病等，患者体内可能含有嗜异性抗体或自身抗体，这些成分在反应过程中具有吸附作用，可能导致假阳性。
2. 标本因素：
标本处理不彻底：血液抽出后未完全凝固，导致纤维蛋白原未完全析出，洗板不彻底，酶残留于反应孔中，影响结果。
标本溶血：细胞内液中的活性酶与底物非特异性结合，洗涤时不易洗去，产生假阳性。
细菌污染：标本被细菌污染，某些细菌含有内源性辣根过氧化物酶，对酶标记的测定方法产生非特异性干扰。
3. 操作因素：
加样不准：间接ELISA标本稀释时加样不准，可能导致阴性或弱阳性标本呈阳性。
洗涤不当：手工洗板时条件一致性差，洗板机使用不当，如针小孔堵塞，未结合标记酶洗脱不彻底。
孵育条件：温箱温度异常或孵育时反复打开温箱门，影响孵育效果，导致假阳性。
试剂因素：不同厂家的试剂混用，标记酶活性或显色液稳定性差，可能导致假阳性。
移液器校验：移液器未定期校验，移液不准确，影响实验结果。
终止液使用不当：终止液中硫酸浓度过高或变质，可能导致酶的活性被破坏，影响结果。
显色时间控制：显色时间过长，可能导致背景升高，影响结果的准确性。
4. 试剂盒因素：
批间差：不同批次的试剂盒可能存在批间差，影响检测结果的一致性。
假试剂盒：使用非正规渠道的试剂盒，可能含有其他指标代替检测目标，导致假阳性。
试剂有效期：试剂长期存放，有效成分衰减，影响检测结果。
5. 样本处理：
抗凝剂影响：如肝素或EDTA抗凝剂的使用，可能吸附酶标记物或抑制酶活性，导致假阴性，间接影响假阳性结果。
样本保存：样本放置时间过长，抗原或抗体活性减弱，可能导致假阴性，间接影响假阳性结果。
样本污染：样本在采集、处理过程中可能被污染，导致非特异性反应。
6. 环境因素：
环境干扰：实验环境中强氧化剂、挥发性物质等可能对检测产生干扰，影响结果。
为避免假阳性结果，应严格控制实验操作，选择高质量的试剂，正确处理样本，遵循试剂盒说明书，定期校验仪器和设备，进行室内质控和室间质评。
