将外源DNA摄取所用的细菌细胞状态在分子生物学实验里被称作感受态细胞，不管是去进行克隆转化，还是构建基因文库，只要熟知感受态细胞的基本特性以及操作技巧，实验成功率就会有显著的提高，接下来从实际使用的层面谈谈常见的问题。
感受态细胞制备方法哪种好
化学法制备感受态细胞，成本低廉，操作简易，适宜日常转化实验，常用氯化钙处理，可使细胞膜通透性得以增加，质粒 DNA 转化效率可达 10^6 - 10^7 CFU/μg。电转化法，需专用设备，然而效率高出两个数量级，适用于连接产物或大片段 DNA 的转化。对于初学者而言，建议率先尝试化学法，待熟练之后再考虑电转方式。
转化效率低是什么原因
转化效率被多个环节所影响，感受态细胞保存不当乃是最常见的原因，反复冻融会致使细胞膜结构遭受损害，冰浴时间不足或者热激温度不准确同样会大幅度降低转化率，在实际操作里发现，每一批感受态细胞都应当做阳性对照验证，使用之前要把细胞放置于冰上充分融化，热激过程必须严格控制在42℃ 45 - 60秒，复苏的时候加入无抗性培养基静置培养。
感受态细胞如何正确保存
经新鲜制备所得的感受态细胞，于4℃环境条件下单放着，且能存放24至48小时之久，不过其效率会跟着时间的流转而逐步衰减。要是打算长期保存它，那就得先分装，之后迅速冷冻到-80℃，每管以50至100微升作为适宜的量。往里面添加终浓度处于5%至10%范围的无菌甘油或者DMSO作为冷冻保护剂，如此这般就能维持细胞的活性。要避开使用无霜 refrigerator，因为温度出现波动会致使转化效率有所降低。取用它的时候应当马上放回到低温的环境里，绝对不可以用手去握持管壁来进行加温。
自制还是购买感受态细胞
处于商业范畴的感受态细胞，于批次之间具备稳定的特性，其转化效率有着清晰明确的标注，适用于那些对于结果重复性有着较高要求的实验。自行制备的感受态细胞在成本方面较为低廉，每管所涉及的材料费用尚不足商业产品的十分之一，如此便适合于大量的常规转化操作。对于时间较为紧张的课题组而言，建议直接进行采购，而当存在需要特殊菌株背景或者大量练习的情况时，自行制备则在灵活性方面更具优势。不管最终选择的是哪一种方式，都要记得在每一批次投入正式实验之前，对其效率进行测试。
