从机体组织当中直接分离获取的初始细胞学名叫原代细胞，这些细胞最大程度地保留了体内细胞的原始生物学特性，在基础科研领域以及药物筛选领域，原代细胞因为这样更接近真实生理状态所以成为了重要工具。
原代细胞是什么
原代细胞是指经采用酶消化或者是组织块贴壁法，从动植物组织当中直接分离出来的第一代细胞，这些细胞未曾经过多次传代，其染色体组型是正常的，它能够切实真正反映来源组织的功能特征，比如说肝原代细胞依旧保留着代谢解毒酶活性，神经元原代细胞能够维持放电能力。
如何分离原代细胞
去除组织表面的血管以及结缔组织，用无菌剪刀剪成一立方毫米小块，加入百分之零点一胶原酶于三十七度水浴中震荡消化三十至六十分钟，终止消化后经一百目滤网过滤，离心收集细胞沉淀，最后用完全培养基重悬，这便是分离原代细胞通常采用的机械剪碎配合胶原酶消化的方式。
原代细胞培养难点
无比敏感的原代细胞，对培养环境而言，操作稍有不当，便极易致使凋亡。其一，消化时间若过长，膜蛋白会遭受损伤，时间过短，又难以获取足量细胞；其二，培养基得添加10%到20%的胎牛血清以及对应的生长因子，而且首次换液需在贴壁后的24小时内完成；其三，支原体污染乃是常见问题，定期运用PCR检测的建议是有的。
原代细胞与细胞系区别
细胞系借由基因突变获取无限增殖能力，而原代细胞一般仅能传代5至10次，前者增殖速度快、均一性良好，然而染色体非整倍体率高。后者增殖速度慢、个体差异大，不过能留存组织特异性标志物。比如说肿瘤相关研究选用原代细胞更能够模拟药物真实响应，并且大规模蛋白生产依赖细胞系。
请问，您于实际操作期间，有没有碰到过原代细胞遭受污染这种情况，又或是活力欠缺的状况呢？倘若有的话，欢迎在评论区域分享您针对此的处理经验哦。
