对于免疫学实验而言，一抗属于识别靶标蛋白的关键核心试剂，其品质直接地决定着检测结果的精确性，不管是Western blot还是免疫组化，精心挑选适配的一抗都是此项实验设计环节内最为重要的事情，要是一抗的性能表现欠佳，那么后续的步骤哪怕怎样去做优化处理，也很难获取到值得信赖的数据。
一抗如何选择
需先确认靶标蛋白的物种来源以及适用实验类型来选择一抗，不同实验对一抗的要求各异，像Western blot要求识别变性蛋白的线性表位，免疫组化却要求识别天然构象表位，查阅产品说明书时要重点关注验证数据还有应用范围。
一抗的效价和特异性
效价所指的是关于一抗而言的有效工作浓度，特异性呢，它所起到的作用是去决定一抗能不能识别唯一的目标蛋白。具备高特异性的一抗得以避免因交叉反应而产生的假阳性条带。这里建议优先挑选经过敲除验证的产品，这类数据能够直观地证实抗体识别的是预期的蛋白，而并非其他的分子。
一抗的保存条件
多数一抗需要在零下二十摄氏度或者四摄氏度的环境下进行避光保存，要是反复冻融的话就会降低效价，收到产品之后要按照推荐方式分装成单次使用的量，这样能够避免遭到污染以及活性出现损失，要注意查看说明书里面的保质期以及稳定剂成分，含有甘油的产品能够直接在零下二十摄氏度保存而不会冻结。
一抗稀释比例
需要通过预实验来确定最佳稀释度，一般是1：500至1：5000。常用的稀释缓冲液是含BSA或者脱脂奶粉的TBST，其能够减少非特异性背景。孵育条件也是相当关键的，4℃过夜相较于室温1小时更有利于特异性结合，特别是针对低丰度蛋白的检测。
你可曾碰到那种，因为一抗失去效力，进而致使实验重复做却失败的状况呢？欢迎来分享你处理此情况的经验哟。
