原代细胞是直接从机体组织而来的，它保留着原始的组织特性以及生理功能，是众多基础研究与应用探索里不可被替代的实验模型。和传代细胞系相比较，原代细胞更能够真实地反映出体内细胞的生物学行为，不过它的获取、培养以及应用也存在不少的讲究。
原代细胞怎么分离
分离原代细胞，关键之处在于，一方面要确保细胞具备活力，另一方面还要将组织里的杂质给去除掉。常用的方法含有酶消化法以及组织块培养法，酶消化法适用于类似肝、肾这种比较硬的组织，这就需要把控好消化时间以及酶浓度；组织块法对于皮肤、软骨等而言会更合适。不管是哪种方法，整个过程都要在无菌的条件之下进行操作，并且还要借助适当孔径的筛网来过滤，如此才能够获取到纯度相对较高的单细胞悬液。
原代细胞培养难在哪
刚获取没经传代的细胞对外界所处状况极为敏感，养分构成的媒介要素、热度、酸碱度稍微存有偏差便极有可能致使细胞走向死亡或者分化出现异常。另外，成纤维细胞易于过度地生长，对目标细胞的增殖予以抑制，故而常常需要借助差速贴壁或者选择性的培养基来实施纯化。最为麻烦棘手的是，刚获取没经传代的细胞增殖能力存在限制，一般仅仅能够传代几次，这便对实验者提出必须提前规划好细胞使用量，从而避免造成浪费的要求。
原代细胞用于哪些实验
鉴于原代细胞更贴近体内状态，它常常被运用在药物毒性测试范围内，以及病毒感染机制研究范畴之中，包括组织工程构建等诸多领域。举例来讲，当进行筛选候选化合物这一行为时，运用原代肝细胞能够更为精准地预估药物的代谢路径以及潜在毒性。再说研究呼吸道病毒这个情况，原代气道上皮细胞能够模拟天然屏障以及免疫反应。这些应用直接对实验结果的可靠性以及转化价值起到决定性作用。
如何保证原代细胞质量
原代细胞质量的保证需落于源头着手，其一要严谨鉴定组织来源，其二要记录个体差异比方年龄、性别，其三在分离后得尽快开展活力检测以及支原体排查。建议每次实施实验时都预留一小部分细胞用以做形态学记录以及冻存备份，另一方面在正式实验开展之前先进行预试验，从而确认细胞对于处理条件的响应契合预期。唯有构建标准化的操作流程，方可使原代细胞切实为研究发挥作用。
