为了抢时间，买了那种号称半小时出结果的PCR试剂盒。
结果呢？熬夜熬到凌晨三点，跑出来的胶还是花的。
我跟你讲，这东西真不是越贵越好。
你肯定也遇到过这种事吧——
拿回来那个试剂盒，说明书所撰写的内容简直是天花乱坠，提及了诸如“高速聚合酶”“专利buffer”这般之类的，然而呢，结果是第一次使用的时候情况还算不错。
放了一个月，再拿出来，扩增效率直接腰斩。
试剂盒怎么存？
开启之初，我亦不知晓，便将其放置于零下二十摄氏度之处，待需用时取出，使用完毕再放归原处。
反复冻融几次后，扩出来的条带跟鬼画符似的。
先是后来才弄明白，酶这个东西珍贵得不得了。取出来之后得马上放置在冰上，用完了要立刻扔回到零下二十摄氏度的地方，多耽误哪怕一点儿时间都是不可以的。
为什么结果总是不理想？
还有那个模板纯度的问题，真的会气死人。
快速PCR，其本来循环时间就短，致使杂质根本来不及实现稀释。上次的状况是，我把土壤样品直接放入其中进行样本运行，最终扩增出来呈现的全都是非特异性条带。
随后，规规矩矩地采用磁珠法进行纯化，将OD值把控在1.8至2.0的范围之内，如此这般，方才有了清清爽爽、毫无杂质的条带。
我那位师兄的遭遇更为凄惨，他购置了一个宣称能够实现3kb扩增的快速试剂盒，并且呢，他执意要去对一个长度为1.2kb的片段进行扩增。
跑出来全是拖尾。
厂商所说的内容并没有错误，人家手册里面确实清清楚楚地写着“最佳扩增范围在500bp以内”，然而我的师兄根本就没有去看呀。
别被“快”迷惑了头脑
你越急着要结果，越容易出岔子。
倘若退火温度出现偏差，那么特异性便会瓦解；要是酶放置时间过长致使活性降低，扩增效率就会大打折扣；甚至仪器的升降温速率一旦无法跟上，快速程序也会变得毫无用处。
偶尔会极其逗趣，实验室当中的人们，出于节省费用的目的，将原本二十次使用量的试剂盒，拆分开来当作四十次去使用。
体系减半这般，结果减半即已作罢，却老是没办法扩出来。最终再重新购置一盒，前前后后所耗资财比原本还要多。
真的，听我一句劝——
这种试剂盒，买回来就分装成小管，一管正好做一次。
别心疼那点管子钱，总比实验失败重新做划算。
当前的快速PCR试剂盒，的确能够将原本需要两小时的实验，成功压缩至二三十分钟。
然而，其前提条件是，你必须切实将它视作祖宗那般供奉起来，从进行存储开始，一直到实施操作，其中的每一个步骤都绝对不可以有所省略呀。
说白了。
工具再好用，不如按规矩来。
