上个月我又扔掉了一整管抗体。
真他妈心疼。不是心疼钱，是心疼那跑了一周的蛋白。
算起来，做实验已经历经三年时间了，期间所使用过的抗体，大约得有五六十种吧。而每一次开启新的抗体时，均如同开展开盲盒这般的行为。
有人跟我讲过，“一抗实际上就是一把钥匙” ，我认为他讲得没错，却是只表达对了一半。
一抗是干啥的
先搞明白这玩意到底是什么。
终极而言，一抗乃是具备特异性识别目标蛋白能力的所谓那个“抓手”，它可以从众多毫无秩序的一众蛋白质当中精确无误地寻觅到你所需要的那一个。
你提及二抗？二抗可是用于捉拿那一抗的。一抗起到抓捕蛋白的作用，二抗会去抓捕一抗，并且再带上一个显色标签，如此一来你便能够看见了。
有些时候为了省钱，买回来的一抗不舍得开封。
把它放置在冰箱里面，一放就是长达半年的时间。当把它拿出来准备使用的时候，却发觉已经不行了。在这之后才明白，像这种含有甘油成分的，必须要放置在零下二十摄氏度的环境下，若是反复地拿出来进行化冻，对于蛋白的结构而言，那可是有着致命伤害的呀。
那会儿实验室的冰箱三天两头被人翻东西，温度从来不稳定。
单抗还是多抗
这个问题吵了好几年了。
入行之初，我曾非常天真地觉得，单克隆抗体就是品质优良且售价高昂的，而多克隆抗体则是价格低廉的次等货色。
后来发现不是。
单抗呈现出极高的特异性，其所识别的表位仅仅只有那单独的一个。要是在制样的进程当中，那个特定表位遭到了破坏，或者是被彻底挡住了，那就糟糕了，信号便会消失不见。
多抗并非那般矫情，存在一群针对同一蛋白不同位置的抗体，当一处被阻挡时，尚有其他位置可供其抓取。
过抗存在个问题，批次间或许差异显著，运气差时买到的两批货物表现全然不同。有位师姐曾因此遭坑，数据前后无法对应，审稿人径直质疑她的结果，那篇论文从修回给打成了重投。
物种那点乱事
最让人头大的其实不是选抗体本身，而是选哪个物种的。
一种抗体能是属于小鼠的、兔子的、山羊的、大鼠的等等之类，另一种抗体需要依据前一种抗体的物种去进行选择，比如说你所购入的是源自兔子的第一种抗体，那么第二种抗体就必须是对抗兔子的那种。
这道理看着简单，但在实际操作中总是容易出错。
曾有一回，我同时跑三个各异的靶标，其中一个用的是鼠源抗体，一个用的是兔源抗体，还有一个用的是羊源抗体。结果呢，我忘记在笔记上面标注清晰，到了做二抗孵育的时候，全部用的是同一个。第二天拍照显影，那画面就如同大型惨痛车祸现场那般，本来该出现的条带没有显现出来，不该有的背景却是一片漆黑。
花了差不多两周才把那批数据补齐。
实验小白选抗体的路子
新手选抗体我建议你别太相信自己的判断。
首先去查询一下其他人曾经使用过什么，去查询一下文献里所采用的是哪一家厂商的，查看一下厂家所撰写的验证数据。对于没有经过验证的应用，不要随意去应用，很有可能会遭遇失败。在我从事WB工作的第一年，由于贪图便宜购买了一款未经验证的产品，结果耗费了将近一个月的时间，最终还是更换了一家可靠的厂商。
部分大牌抗体着实价格高昂，一根二抗便要超过千元，一抗的价格更是不言而喻，然而进行一次WB，将各类试剂、样品以及所需时间都计算在内。
其实便宜的更贵。
真正让人崩溃的不是选错
选错了大不了扔掉重新买。最折磨人的是选了对的，却用不对。
怎样去稀释一抗呢，说明书所写的内容跟实际能够用出来的效果常常有着很大的出入。别人家的实验室在1:500的比例下效果是很好的，然而你这个样品的浓度却是不行的。自己去摸索浓度梯度这样的事情，做过的人都明白会有多烦扰。
除此之外，还有孵育的条件，是在室温下进行一个小时呢，还是在四度的环境中过夜呢，每一个抗体都有着其自身特定的情况。
写在最后的话
好多年以来，于实验室当中，极富成就感之际是在历经一整版全为失败结果之后，忽然有一日，那张膜上面的条带清晰明了，正是你所期望的那个位处。
你在那盯着那张条带看半天，有点不敢相信是自己做的。
选对一抗那东西，能让你开心好长一阵子，选错它，能令你对人生心生怀疑。期望你能尽早寻得属于你的那把锁，获取干干净净的良好成果。
