去年在透射电镜室熬到凌晨三点的时候，
对着模糊的条带图哭，
就是因为选错了荧光标记抗体。
后来才发现，很多新手踩的坑，其实百度上没几篇说得接地气。
荧光标记抗体怎么选不踩坑
新手入门第一反应直接搜最贵的，其实真不是这样的。
得先摸清楚自己要做的实验类型，
包被体系和孵育温度差两度，选出来的就完全不一样。
我见过有人把测胞内靶点的抗体拿去做表面染色，
孵育了三小时，最后拍出来的背景亮得像夜景灯。
浪费了三个96孔板，白搭整整两天时间。
荧光标记抗体保存诀窍
别刚拿到手，就直接放到温度为-20℃的冰箱门子之上，冰箱门每天都会开启，温度出现波动，这样能把荧光基团晃得很早便猝灭了。
最好放在盒子里搁冰箱中层，分装好小体积放着别反复冻融，
别不舍得多花两分钟分装，后面能少废好多批次样本。
另外，不要随意添加叠氮钠，多数新手并不清楚这东西是能够让特定荧光波长得以淬灭的。
以前小组里新来的师弟图省事直接往母液里加满满一管，
一周过后，整个管线之中的荧光信号剩余量不到三成，那整盒价值几百块的抗体就此直接废掉了。
我有一回对超低温柜进行整理，从中翻找出了一管用黑纸包裹着的分装小管，这根管是半年之前的，当时忘记它叫什么名字了。
拿起它，使其恢复到室温后重新测量，结果发现，其信噪比甚至并不比刚购买回来的时候低。直到这时，才明白，如果能够好好地遵循保存规则，那么就能减少许多麻烦。
荧光亮度不够有啥办法
先别着急，直接把抗体浓度增加到三倍，那样背景会直接将所有阳性信号覆盖掉。
先试着对封闭时间进行半个小时的提升，去换用带有1%胎牛血清的封闭液来尝试一下，用这种方式试试看。
预先将一抗孵育完毕后，把洗涤步骤额外增加一回，运用Tween比例相对高一些的洗涤液浸渍清洗10分钟。
我上周给隔壁实验室同学赶紧急预实验的时候，
对于4摄氏度的情况，先进行缓慢孵育，之后将其调整到室温，接着在摇床进行轻晃的动作，持续两小时，最终呈现出来的成片效果，直接让他看后愣住了。
他硬是对着荧光显微镜望了足足十分钟，而后说道，“我先前怎么就没思考到差了这么多的温度差呢。”。
好多由大家探寻得出的，进行微调的微小操作，远比你毫无头绪地叠加那些价格高昂的试剂，要有用得多。
现在日常蹲在实验室台子旁边调仪数参数的时候，
看见旁边，有个新来的师弟，正抱着抗体产品说明书，死命地啃，就会走上前去，拍拍他的肩膀，跟他聊上两句，讲讲当初自己踩过的那些弯路。
也算是不想看到新一代的孩子们，如当年的我那般，守在显微镜旁，熬过漫长的夜，落下毫无价值且缺乏意义的泪水。
