初次触碰小鼠组织是在去年，于师姐实验室的操作台上，当时就连镊子该怎么握持都懵了足足三分钟。用移液枪头吸取半管已预热的 PBS 时，中途指头竟抖得厉害，致使液体断断续续地滴落到手套套袖的外侧，滴滴答答作响。
曾经那次培育出来的首例代细胞，零零散散地附着在瓶子底部，而另一半则聚集成团漂浮在液体表面晃荡着，晃来晃去。
回头抱着资料啃了将近两个月，踩碎了超多无人提及过的坑，才终于摸索出些许稳稳当当的门道。
小鼠原代细胞怎么取材料
在第一步展开对材料的处理时，其节奏方面，确实是半点马虎状况都绝对不能出现的。在做完脱脊处理这个活动之后，要即刻将其放置到预先准备好的、用于预冷的缓冲液当中。
别在操作台旁边攥在手里等着和同事闲聊，把等太久的小组织块拿回去剪，最后产出来的细胞活性会低落到让鼠怀疑自己的人生。
摄取如海马、脾脏这般柔软、细碎的组织，运用弯曲的、细口的剪刀，轻轻地拨弄着行进，如此最为适宜。
硬一些的肌肉组织，首先要把周边包裹着的脂肪统统都撸拿下来而后再进行下剪，并且最终剪到无法看见显著的大颗粒之际就大致差不多了。
别贪图省事用手持电动绞肉器，上次因为偷懒用过一回，核心部位的细胞全被捻成碎末状而渣渣，白白等过三小时。
小鼠原代细胞消化要多久
消化时间这个指标，网上一半的说法全是模棱两可的大概值。
同一批次所获取到的鼠组织尺寸较大，据此胶原酶进行消化时的时长便需要顺着形势再多延长五分钟。碰到寒冷的环境要多暂留一会儿，一旦酶的活性降低一半，那就得再补充半毫升新的。
消化到能看见培养液慢慢变的微微雾状的时候就别死等了。
提前三分钟终止消化，比把组织块全搅成稀烂要靠谱一万倍。
我先前设定十五分钟的倒计时铃，恰好卡着时间点捞出并消化完皿，有的批次最终贴壁生长的密度，相较于超时放置二十分钟的组，整整多出两倍。
小鼠原代细胞避免污染技巧
操作台照完紫外之后别手急得裸手伸进去乱跑。
将酒精对着腕口以及刚戴手套的指缝，全部喷洒一遍之后再去触碰器材部件。那些肉眼无法看见的小杂菌孢子，全都隐匿在操作台边缘的接缝当中。
剪之前先把组织块倒进离心管，缓冲液冲洗三次以上全换尽。
要是担心毛会进到细胞悬液当中，那么在剪之前，能够先轻轻地用沾了酒精的湿巾再度去擦一下小鼠皮毛的外部部分。
最近连续三批次原代放培养箱里面，整整四天观察啥怪菌也没长。
跟年初的时候相比，养一批就脏一批，半个月里每天花时间去整理那个被弄得底朝天、满是污染废液的缸。
小鼠原代细胞传代注意什么
在首代贴壁完全达成之前，千万且一定不要随意晃动瓶子。存在这样一些细胞，它们刚刚触摸到培养皿底部的面积仅仅只有一丢丢。
当捧着培养皿起身去寻找移液枪时，出现了晃一晃的情况，并且是持续地晃，在这期间，已经刚贴好的盘里那半盘即将长出来的小家伙，直接因为这样使劲地晃而被晃得浮起来，接着飘飞跑掉了。
第二天往培养箱望去培养瓶底空荡荡的，心态直接跟着垮塌掉。
初次试着做小鼠原代的那段时日，常常是周五一直熬到夜里十二点，将板子轻轻放置到温箱子里，接着关闭仪器锁好门，然后一路骑着单车回家。即便风把实验室白大褂的下摆都吹得飘起来了，也完全觉察不到哪怕一点点的凉意。
有一种成就感，是手里能摸到实实在在的活性细胞，仿佛即使多熬些夜，多经历几次踩坑碰壁，最终也觉得挺值得的。
