在实验室当中,最让人惧怕的事情,并非是实验遭遇失败,而是你精心培育了长达大半年时间的细胞,结果根本就不是当初你所认为的那一株细胞。
你本以为自己所养的是Hela,然而实际上养的却是他人的肝癌细胞。你原本以为做出的数据能够用于发表文章,可是最终却被审稿人以一句“细胞交叉污染”直接给打回来了。
这种事儿,太常见了。
最初我做实验的那几年,隔壁实验室存在有个师兄,他养了一株被称为“稀有细胞”的生物,时间长达一整年,期间发表了三篇篇幅较小的文章,然而最终进行STR鉴定的时候,却发现其本质完全且仅仅就是最常见不过的293T。
三篇文章,全废。
那一天,他坐在实验室的门口,抽着烟,一根接着一根地抽,始终不说话,我看着,心里直发毛。
到底啥是STR鉴定
STR,全称短串联重复序列,听起来很高端对不对?
其实说白了,就是给细胞做“DNA指纹”鉴定。
在每个人的DNA内里,在每个细胞株的DNA当中,有着一些特定模样的短重复序列。这些系列仿佛人的身份证号码那般,从理论上来说,每个细胞株都是绝无仅有的。
你选取一管细胞,拿去做STR鉴定,所呈现出来的结果,便是这一管细胞的“身份证号码”。
紧接着,将此号码拿去跟数据库当中已知的细胞株展开比对,如此一来,便能够知晓——你手中所握的究竟是何人。
为啥非得做这个鉴定
你以为细胞很好认?
太天真了。
细胞被污染这种情况,相较于你所设想的要广泛得多。存在相关统计表明,在全球范围之内,大概有15%至30%的细胞株,都曾经遭受过交叉污染。
Hela细胞特别会生出麻烦,它拥有极强的生长能力,生长速度极快,稍有不慎便掌控了其他细胞。
你实验室当中同时饲养着几种细胞呀?那么你基本上每一天都在跟污染风险进行打交道呢。
再说了,现在杂志社越来越精了。
好多高分期刊径直提出要求,在投稿之前得提供STR鉴定报告,没有这个报告?不好意思,稿件会被退回。
当初有人觉得这是多此一举,现在被退稿了才知道后悔。
细胞被污染了会有啥表现
说实话,有些污染你肉眼根本看不出来。
并不是所有的污染,都如同细菌污染这般,会出现培养基变得浑浊的情况,会致使pH发生变酸的现象,会有细胞大批死亡的状况。
有一些交叉污染的情况,细胞生长得还算不错,在形态方面也没有十分显著的改变。你每天都盯着看它,认为不存在问题。
但数据就是不对劲。
重复不出来。别人重复不出来,你自己也重复不出来。
这时候你才开始怀疑:是不是细胞出了问题?
怎么拿到STR鉴定结果
现在做STR鉴定其实很方便了。
不需要你进行自身搭建平台的行为,不需要你去自行购买那些试剂盒以及仪器。有诸多生物公司提供此项服务。
你把细胞寄过去,等结果就行。
多快?一般一周以内。
价格?几百块到一千多不等,看你要做几种位点检测。
说实话,跟你的时间和精力比起来,这点钱真不算什么。
多久做一次合适
这个问题其实没有标准答案。
存在这样的情况,即有的实验室有着相应规定,对于每个新进入的细胞株而言是必须要先去做一次鉴定的,以此来确认没有出现搞错的状况。
有的实验室规定,每半年做一次,以防中途污染。
还有的人,只有在数据出问题的时候才想起来去做。
我的建议是:别等到出问题了再做。
你去思索一下,你费尽心力辛辛苦苦耗费半年时光去做的实验,数据已然积攒了数量众多的一大堆,然而最终却发觉细胞存在问题。那么这般历经半年的时间,难道不是全部都白白浪费掉了吗?
做鉴定有啥要注意的地方
先说说采样。
你必须确保送去检验的细胞是具有生命力的,其数量是充足的。通常来说起码要有几十万个细胞才行,具体的情况要看公司所规定的要求哦。
再说说保存。
细胞最好是在对数生长期的时候收,状态好,结果才准。
倘若你的细胞是处于悬浮培养态,那就得记着把培养基清洗得干干净净,不然培养基之中所含的蛋白之类的物质会对结果产生影响。
别贪便宜。
有些公司报价很低,但做的位点少,结果就不够精准。
几百块钱你花出去又省下来,然而那鉴定结果却模棱而且两可,如此这般那跟没做究竟能有什么样的区别呢?
说实话,这事儿真不能省
我现在回想起来,真的后悔当年没有早点做STR鉴定。
那时候,感觉价格高昂,感到操作繁琐,心里想着“我的细胞状态良好,为何要去开展鉴定工作呢”。
结果呢?
浪费了多少时间,做了多少无用功,只有自己知道。
直至实验进行到最终阶段,最为惧怕的并非是无法达成,而是已然达成却不晓得自身所从事的究竟是什么。
细胞是实验的根,根出了毛病,上面开什么花结什么果都没用。
你要是还没做过STR鉴定,真的,别拖了。
几百块钱的事儿,能给你省下几个月甚至几年的白费功夫。
实验室里那些熬夜做实验的夜晚,不该为这种错误买单。