做了这么多年PCR，我算是看透了。
针对不同的样本，使用不同的引物，处于不同的实验室环境等等。每一次进行实验时，就如同在拆解盲盒一般。部分时候，原本运行得十分顺畅，然而更换了一批模板后，却直接宣告失败了。真是让人无奈郁闷呐。
未使用通用型PCR试剂盒前状，我恒以为“通用”乃噱头焉。迄至逼入绝境——实验室新来之实习生将DNA与cDNA混淆，模板浓度亦稀稀拉拉，未承想那时我随手拎取一盒新型通用试剂，跑了三十个样本……竟皆现条带矣。
那一刻，我差点哭了。
试剂盒不“通用”，实验就是拆盲盒
我说句难听的。
市场当中诸多号称“通用型”的试剂盒，事实上仅仅是將几种酶的配方进行混合，还添加了一堆稳定剂，没错，它具备扩增的能力，然而效率如何呢？特异性又怎样呢？
真正的通用，不是“什么都能扩”，而是“什么都扩得好”。
你必须具备那种兼容性，不管模板GC含量是高还是不高，不管引物Tm值是否飘忽不定，甚至即便样本中带有了些许抑制剂，它都能够为你跑出来。
我见识过数目众多的人，进行一回PCR更换三四种酶，最终依然跑不出条带。随后便开始疑惑自己是不是手部颤抖了、枪头是不是没有校准……
兄弟，真不是你的问题。
是试剂盒不行。
为什么你的PCR总是“时灵时不灵”
先说个真事儿。
我的一个朋友，从事环境样本检测工作。从土里挖掘出的微生物DNA，具有杂质众多的特点，而且浓度很低，其扩增效率极其低下。他更换了好几家公司所生产的“通用型”试剂盒，然而结果呈现出两种情况，要么是非特异性条带到处都是，要么是主带模糊不清。
到了最后，他用的是一款由我做推荐的，管子里面添加了特殊增强因子的那种，你们猜猜会怎么样。
同一个模板，同一对引物，条带又亮又干净。
不是玄学。
通用型PCR试剂盒之心，非“酶强与否”，乃“体系稳否”。稳至无论所用模板为纯化质粒，或粗糙基因组DNA，抑或一段cDNA，皆可给出可重复之结果。
你要知道，做实验最怕的不是做不出来。
是做出来一次，下次再做又没了。
学会“偷懒”，才是实验高手的秘诀
别笑。
我做PCR十年，越来越懒。
过往进行一次PCR时，退火温度需要进行梯度摸索，延伸时间需要反复去调整，镁离子浓度必须精确到小数点之后的两位数字……如今呢？选择通用型试剂盒，一套程序就能全部适用。
退火温度？55度到65度都行。
延伸时间？按常规设，不用管GC含量。
模板量？从1纳克到100纳克，一个反应体系全搞定。
这不是偷懒。
将精力节省出来，用于真正关键之处，像是在设计引物时多思考一番，像是跑完胶后认真剖析数据。
实验做得好不好，从来不是看你调了多少参数。
是看你有没有稳定的试剂盒，撑住你的每一次操作。
挑通用型PCR试剂盒，看这三点就够了
看酶的保真度。
专门用于普遍情况的类型并不等于“随意而为的类型”，质量优良的适用于多种情况的试剂盒，所采用的都是经过改良的具高度保真性的酶，这种酶既能够扩增出长度较长的片段，又能够确保碱基不发生变异。
看抗抑制能力。
在良好的试剂盒当中，一般而言会添加某些特别的辅助蛋白或者小分子，以此助力你去抵御样本里面那些令人厌烦的抑制剂，其中包括腐植酸、血红素、尿素，这些均属于PCR杀手。
看包装方式。
你必定遭遇过这般情形：购入了一整大管的酶，再三地打开盖子，再三地进行冷冻与融化，最终酶的活性降低了，跑不出相应的结果。
一类很不错的具备通用性的试剂盒，其呈现形式，要么是预混液的样子，直接添加模板以及水便能够进行相关操作；要么是单管分装的情形，使用完毕后就丢弃，以此来防止污染以及活性出现损失。
别样小瞧这个细节，实验的成功或者失败，常常就隐匿于这些你平常不太予以留意的地方。
最后说点掏心窝子的话
我不是在给哪个品牌打广告。
我仅仅是觉着，进行实验原本就已然足够疲惫了，PCR还是我们最为常规的操作行为，并无必要将时间耗费在“调试”方面。
选一个靠谱的通用型PCR试剂盒，把它当成你的实验标配。
无论你今儿所进行的是小鼠基因型鉴定，亦或是明日即将开展的转录组验证，甚或是后天出现了一堆稀奇古怪的环境样本，都要开启同一个盒子，运用同一套体系，运行同一套程序。
稳定，可控，省心。
这他妈才叫“通用”。
别再去试错了。你的时间和精力，值得被更好的试剂盒善待。
