PCR试剂盒选哪个？快速出结果才是硬道理
咱实验室那点事儿，懂的都懂。
那堆积如山的样品, 那不停嗡嗡运转的机器, 然而最让人担忧害怕的偏偏就是——等。等待PCR完成, 待到最终结果呈现, 等待的过程中内心都凉了好大一部分。特别是那些性子急切的项目, 老板催促、客户催促, 就连隔壁工位的小王也来催促, 还说“你进行的此次扩增能不能再加快一些节奏度? ”。
初始之际, 我满心疑惑, “快速PCR扩增试剂盒”究竟是何物? 心想不过就是个盒子罢了, 能有多快呢? 可是, 最终却被事实狠狠打脸了。
当我头一回使用之际, 我目不转睛地瞅着那台用于聚合酶链式反应的仪器, 内心默默叨念着“加快加快, 还要再加快”。嘿, 你还别说, 以往历经两小时才顺利完成的工作, 现如今在不到四十分钟的短短时间便得出可使用的数据了。当时我就只有唯一的一个特定感受 —— 这仪器物件, 实在是特别地契合像我这样以急切速度要求的懒惰之人。
到底快在哪儿？
实际上, 从原理方面而言, 确切地讲就是针对酶以及缓冲液的配方实施了优化处理。然而, 咱先不去探讨那些过于高深莫测的专业术语, 毕竟那会让人感觉特别疲惫。你只需要牢牢记住这么一句话就行啦: 它能够在时间循环更为短暂的情形下达成同样的扩增效率。
以前的试剂盒, 每一个步骤, 都必须老老实实地等够相应时间, 宛如老牛拉车那般。那新的快速试剂盒又如何呢? 它恰似更换了一台跑车, 油门一经踩下, 便嗖的一下抵达了终点, 戛然而止了。
我有一位同事, 是老李, 他使用三年之久的旧试剂盒, 无论如何都坚决不肯更换。此后呢, 经我强行塞给他一管快速试剂盒让他进行测试。随后, 他在做完第一轮之后, 便赶忙跑过来且对我说: “哎呀, 天哪, 之前难道我一直在白白浪费自己的生命吗? ”。
温度适应性强，别瞎操心
另外存在着一件特别令人烦闷的事情, 某些试剂盒极其娇弱, 只要温度稍微出现少许偏差, 立马就呈现出不佳状态, 条带稀疏零散, 形象如同未曾进食一般。
但对于快速 PCR 扩增试剂盒而言呢? 它很耐用。我进行过好几次测试了, 仪器升温以及降温并没有那么精确, 可它依旧能够跑出美观的条带。这不是什么玄之又玄的事情, 是因为在配方当中添加了某些能让其稳定的物质。
你说省不省心？省心。
样品类型多？没事儿
那些放置有各类样品的实验室, 今天获取到的是血液, 明天接收的是某个组织, 而后天所得到的也许是从土里挖掘出的东西。以往所使用的试剂盒, 一旦遇上复杂的样品, 就如同人患上感冒那般, 效率呈现出直线式下降。
用于快速PCR扩增的试剂盒呢, 要说它呀, 它宛如一位阅历丰富的老江湖那般, 什么样的场合都见识过。我尝试将它的扩增体系直接应用于那些所谓“脏”的样品, 而让人意想不到的是, 居然能够成功扩增出来, 并且其扩增速度还十分快速。
那一刻，我觉得这盒子值了。
别被“快速”俩字吓着
部分人一经听闻“快速”, 便心生忧虑: 速度快是否就表明不准确? 是否会遗漏模板? 扩增效率是否会降低呢?
我跟你说，别想太多。
“快”与“准”, 并非是那种只能二者择其一的情况, 当下的技术已然和十年前的那一套完全不同了, 我曾进行过对比，针对同样的一批样品, 旧的60分钟方案以及新的35分钟方案, 其Ct值之间的差异微小至极, 小到几乎可以忽略不计, 要是你进行的是绝对定量, 那么那一点差别基本上不会产生影响。
总之呢, 自我更换了快速试剂盒之后, 就再也没回过头去。节省下来的时间, 就算是哪怕能多喝上一杯咖啡, 以及能多去刷看几篇文献, 这也总归是要比干巴巴地等待着来得强一些呀, 不是吗?
价格贵不贵？
这可能是最后一个让人犹豫的点。
实实在在地讲, 同样是用于扩增的试剂盒, 快速版本的的确是相较于普通版本要贵上那么一点点。然而你要去计算一下这样一笔账: 能够节省下来的时间可以多进行几批样品的操作, 仪器也能够更早地空出来供其他人使用。实验室的流转效率得以提升, 老板看到了也会感到开心。
并且当下在市面上存在着许多品牌, 它们均拥有快速版本, 其价格也已经竞争得相差无几了。你去多询问几家, 说不定能够寻觅到性价比极其高的。
我当初试水的时候，先买了一小盒，用完就后悔——后悔买少了。
写在最后
事实上呢, 挑选试剂盒这桩事情, 跟挑选工具是一样的情况。是否适合, 唯有亲自上手使用过后, 才能够知晓。然而要是你向我询问, 快速PCR扩增试剂盒有没有值得尝试的价值呢? 我所能给出的回答仅仅是: 尝试一回, 你日后就再也无法回到从前了。
请勿让“等”演变成你实验进程里的阻碍, 那些被节省下来的时间, 不管是用于撰写发表论文, 还是选择安逸放松, 总之都要比一味盯着PCR仪屏幕而无故发呆来得更有意义。
实验室的日子已经够苦了，能快一点是一点。
