也不是什么新鲜事。
上周隔壁实验室的小王，对着显微镜骂了句娘。
他所饲养的Hela细胞, 成片地飘浮起来, 恰似秋天的落叶那般。那只装有培养基的瓶子, 他使用达三个月之久, 始终放置于4度冰箱的最里面, 致使标签快要被磨得消失不见。他向我发问, 你讲这东西究竟何时过期呀。我瞧了一眼, 乃是去年六月的。
他说，没事吧？我说，你猜。
为什么你的细胞总是莫名其妙就死了？
其实我们都知道答案，只是懒得承认。
细胞完全培养基此物, 讲真就是细胞的食物。人如果每天吃变质的米饭会腹泻, 细胞要是天天饮用变质的“生命营养液体”肯定会呈现死亡状态给你瞧。然而关键在于, 诸多情形下压根不是存期超长变质的情况——而是从一开始就连这瓶物质究竟是什么完全没弄清楚。
你去问刚进实验室的研究生，问他你用的培养基里都有啥。
他说，就……DMEM加血清啊。
然后呢？
然后？没了。
血清和培养基，到底谁才是主角？
这事儿挺有意思的。
好些人觉着, 血清才是主导。培养基呢, 只不过是一种液体。往这种液体里添加一点儿氨基酸、葡萄糖还有维生素, 接着再掺和上10%的胎牛血清, 如此便完成了。细胞存活状况如何, 重点在于血清的批次。
但你想过没有——
为什么同样的血清，配不同的培养基，细胞状态天差地别？
为何有的细胞, 在A家所提供的完全培养基之中, 呈现出活蹦乱跳的状态, 然而当将其换到B家所提供的培养基时, 便变得蔫了下来?
并非血清的缘故, 是那个被你视作“水”的事物, 实际上远比你所认为的要复杂得多。
完全培养基，它不是一个配方走天下的。
真的存在“万能”的完全培养基吗？
不可能。
我所见识到的最为离谱的事情, 乃是存在有人, 拿着同一瓶完整的培养基, 去培育HEK - 293以及MCF - 7, 其声称, 皆是人的细胞, 会有多大的差异?
结果HEK293长得飞起，MCF-7两天就给你颜色看。
每种细胞对于营养的需求并非相同, 存在差异。其中有些细胞喜好葡萄糖, 有些细胞惧怕谷氨酰胺, 有些细胞对pH极度敏感, 缺乏耐受能力, 有些细胞会因为略微缺少生长因子而消极。完整培养基里的“完整” , 并非针对细胞而言, 而是针对你的实验方案而言。
你选培养基，不是选“最好的”，是选“最对的”。
你买的培养基，可能根本不适合你的细胞
这可能是最扎心的事实。
在众多商业化的完全培养基之中, 实际上讲, 可谓是“最大公约数”这般的存在, 它能够确保大多数常用的细胞系得以存活, 无论如何, 是并不保证其存活状态究竟如何的。
我知晓有个从事原代细胞培养工作的男性友人, 他尝试了市面上七八种宣称“无所不能”的完全培养基, 结果全都宣告失败。最终是他自行鼓捣出来的配方, 基础培养基更换了三种添加剂比例之后, 历经三个月不断探索, 才照料好了那批神经干细胞。
他说了一句话我到现在还记得：
“所谓的完全培养基，不是给你省事的，是给你一个起点。”
起点。
这个词挺妙的。
你真的会保存培养基吗？
好，就算你买对了培养基，你会保存吗？
我打赌，八成的人都会犯错。
放置在4度的冰箱里, 并且要避免光照, 这属于大家都应该知晓的常识之类。可是你清楚吗, 一旦完全培养基之中添加了谷氨酰胺以及血清, 其有效的期限就会大幅度地缩短? 你是否了解反复进行加热会给生长因子带来多大程度的损伤? 你知不知道当培养基处于37度的水浴锅中的时间超过30分钟之后, 某些成分就已然开始降解?
不，你大概不知道。
因为说明书上写了，但没人看。
所有人都是依据感知得来的判断——感知到这瓶子开启已经两个月了, 认为应该仍旧可以使用；感知到今天调配好的明天使用, 放置在室温环境下一整个晚上是没有问题的；感知到用水浴锅稍微加热一番而已, 又不是像煮鸡蛋那样。
细胞不会骗你。它只会死给你看。
所以到底该怎么选？
说几句人话吧。
甭要迷信那所谓的“通用型”, 你所养的是哪种细胞, 那就去查找它所需的是何种基础培养基, 以及何种添加剂组合, 查找不到的便自行去做梯度实验, 这活儿虽烦, 可却逃避不掉。
关于批次验证这件事, 其重要程度是不言而喻的。血清是需要依据批次来进行测试工作的, 完全培养基同样如此。就算是同一个牌子下面的不同批次产品, 有可能存在的差别之大, 会大到让你对人生都产生怀疑。所以在购买之前, 要向厂家索要样品, 先进行一批的试用, 等稳定下来之后再开展批量采购行为。
不要贪图便宜, 在这个圈子里, 便宜的东西没有好的质量, 好的货物因为便宜的价格而难以生存, 一种定格价格低得出奇、荒谬的完全天然培养基, 你会有勇气去使用吗? 反正我是没有这种胆量的, 细胞的价值可比你昂贵许多了。
知晓去查看成分表, 并非是要你能够明白每一个化学方面的名词, 而是要去留意看一看是否存在谷氨酰胺替换物品, 是否有着酚红, 是否有HEPES, 这些细微的情节决定着你的实验究竟可不可以被重复。
也是最重要的一条——
别把完全培养基当耗材。
它不只是一瓶粉红色的水。
细胞活着, 它是依仗, 细胞分裂, 它是依仗, 细胞表达蛋白, 它是依仗, 细胞乖乖配合你做实验, 它是依仗。
你舍不得花时间研究它，它就舍得让你从头再来。
做实验这事儿，从来都是你怎样对细胞，细胞就怎样对你。
没有捷径。
真的没有。
