您好,欢迎来到派瑞曼-上海博湖生物科技有限公司商城!
021-5776 3112

H2S含量检测试剂盒

BH-9611346
收藏产品
货号 纯度 规格 目录价 会员价 库存 数量 购买
BH-9611346-100管/96样 T 100管/96样 ¥700.00 登录查看
BH-9611346-50管/48样 T 50管/48样 ¥360.00 登录查看

H2S含量测定试剂盒说明书

                                    微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义: 

H2S是一种新型气态信号分子,存在于脑内的神经递质,生理浓度的H2S对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用,并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。

测定原理:

H2S与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝,亚甲基蓝在665nm处有最大吸收峰,通过测定其吸光值可计算H2S含量。

自备仪器和样品:

天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体16mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体8mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:液体8mL×1瓶,4℃保存。

试剂五:液体1.5mL×1管,4℃避光保存。

样品处理:

1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min然后10000g4℃,离心10min取上清置于冰上待测。

3. 血清(浆):直接测定。

操作表:

1、 酶标仪预热30min,调节波长至665nm

2、 操作表

 

空白管

测定管

样品(μL

 

150

H2OμL

150

 

试剂一(μL

150

150

充分震荡混匀

试剂二(μL

150

150

10000g4℃,离心10min,去上清,留沉淀

H2OμL

150

150

10000g4℃,离心10min,去上清,留沉淀

试剂一(μL

75

75

试剂三(μL

75

75

充分震荡混匀

试剂四(μL

75

75

10000rpm4℃,离心10min吸取200μL上清96孔板

试剂五(μL

10

10

混匀,25静置5min,测定665nm吸光值,记为A测定和A空白,ΔA=A测定-A空白

H2S含量测定试剂盒说明书计算公式

96孔板测定的计算公式如下

标准曲线回归方程为:y = 0.0022xR2 = 0.9988

(1)组织样品 
a.按照蛋白浓度计算
H2S(nmol/mg prot)=×V反总÷(V样×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr
b.按照样本重量计算
H2S(nmol/g 鲜重)=×V反总÷(V样÷V样总×W)= 681.8×ΔA÷W
(3) 细胞
H2S(nmol/104 cell)=×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量(万个))=681.8×ΔA÷细胞数量(万个)

(2)液体样品H2S(nmol/mL)=×V反总÷V样= 681.8×ΔA
V反总:反应总体积,0.225mL;V样:反应中样品体积,0.15mL;V样总:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g;Cpr:蛋白浓度,mg/mL
注意事项
最低检出限为1nmol/mL。


搜索MSDS
搜索质检报告(COA)
相关产品
H2S含量检测试剂盒
货号:BH-9611346 规格:100管/96样
会员价: