使用目的
本试剂盒用于测定样本中生物素(biotin)的含量。
实验原理
本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中生物素(biotin)水平。用纯化的生物素(biotin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入生物素(biotin),和HRP标记的生物素(biotin)抗原,使它们竞争结合,,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。样本颜色的深浅和样品中的生物素(biotin)的含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中生物素(biotin)的含量。
产品属性
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中文名字
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生物素(biotin)酶联免疫分析竞争法ELISA试剂盒 |
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英文名称
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Biotin Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) Kit |
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检测范围
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1.2μg/L-42μg/L
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规格
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48T/96T
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货号
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PM190514 |
产品介绍
商品简介:生物素(biotin)酶联免疫分析竞争法ELISA试剂盒是一种用于检测生物样本中生物素(biotin)含量的免疫学检测工具。ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)即酶联免疫吸附试验,是一种基于抗原与抗体特异性结合原理的免疫学检测方法。生物素(biotin)作为一种重要的生物分子,在生物医学研究中具有广泛的应用价值,因此生物素(biotin)酶联免疫分析竞争法ELISA试剂盒在科研和临床诊断中具有重要意义。
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产品状态
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液体
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实验方法
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请索取产品说明书
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运输方式
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快递包邮
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储存条件
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低温避光保存
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产品特点
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灵敏度高
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生物素(biotin)酶联免疫分析竞争法ELISA试剂盒能够检测样本中微量的生物素(biotin),具有较高的
灵敏度。
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特异性强
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试剂盒中的抗体能够特异性地结合生物素(biotin),避免了与其他分子的非特异性结合,从而提高
了检测的准确性。
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操作简便
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试剂盒提供了详细的操作指南和必要的实验器材,使得实验过程简便快捷。
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重复性好
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经过严格的质量控制,试剂盒具有较好的重复性和稳定性,能够满足科研和临床诊断的需求
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试剂盒组成
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1
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30倍浓缩洗涤液
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20ml×1瓶
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8
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标准品S1(40μg/L)
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0.5ml×1瓶
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2
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酶标试剂
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6ml×1瓶
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标准品S2(20μg/L)
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0.5ml×1瓶
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3
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酶标包被板
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12孔×8条
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标准品S3(10μg/L)
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0.5ml×1瓶
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4
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显色剂A液
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6ml×1瓶
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标准品S4(5μg/L)
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0.5ml×1瓶
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5
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显色剂B液
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6ml×1瓶
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标准品S5(2.5μg/L)
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0.5ml×1瓶
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6
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终止液
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6ml×1/瓶
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9
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说明书
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1份
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7
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样品稀释液
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6ml×1/瓶
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10
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封板膜
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2张
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标本要求
1.标本处理:(1)水样 采集后经 -20℃反复冻融三次,再经玻璃纤维过滤后,备查
(2)组织 样品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相关文献提取进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,备查
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 加样:分别设标准孔、空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
7. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值小于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月