SET2这个细胞，说实话，很多做实验的人第一次听都会懵。
它可不是那种仅仅随意翻翻文献便能够弄明白的细胞系, 甚至其名字看上去就略微有点怪异罕见。然而呢, 倘若你在钻研成人急性巨核细胞白血病这条道路上前行得足够深入久远, 那么早晚有一天会碰到它。
我最初首次接触SET2, 缘由在于实验室要搭建一个巨核细胞分化的模型。市面上常见的白血病细胞, 诸如HL - 60、K562, 那些与巨核细胞方向存在偏差。HL - 60能够分化成粒细胞或者单核细胞, K562可以朝着红系方向转变, 然而要寻觅一个稳定又偏偏专门指向巨核细胞系的, 确实得将目光投向SET2身上。
SET2这个细胞到底从哪来的
它是从一名成人急性巨核细胞白血病患者的骨髓当中分离出来的, 有一点极为重要, 鉴于诸多细胞系是来源于儿童或者婴幼儿的, 而成人的巨核细胞白血病自身就极为罕见, 能够在体外成功建系且得以稳定传代的样本量, 更是少之又少。
当时查文献时, 我心里就在琢磨, 这个细胞系的价值, 在很大程度上是因其的“出身”使然。成人急性巨核细胞白血病, 你能相信吗, 其发病率在所有白血病当中仅占那么极其微小的一点, 然而偏偏却有很高的恶性程度, 还特别不好治疗。
为什么SET2能撑起一个实验模型
不少研究者会认为, 开展白血病研究, 挑选一个普通的细胞系就行。然而, 关键在于, 巨核细胞系统跟其他血细胞系统差异极大。它关联着血小板生成！关联着骨髓微环境里那些稀奇古怪的相互作用！要是借用别的细胞系来模拟, 得出的数据你根本不敢往论文里写！
SET2细胞的厉害之处在于, 它表达一系列巨核细胞特异的标志物, 这些标志物包括CD41、CD61等。并且它本身带有一些特定的染色体异常, 这些异常在临床样本里也能够找到。所以利用它来做药物筛选或者机制研究, 数据的转化价值就提高了好多。
严格来讲, 你凭借它所开展的实验事例, 老板瞧见之后会予以认可表示“行”, 而审稿人看到之后并不会持续追问你“你所选用的这个模型到底靠不靠谱”。
养SET2的坑，我踩过几次
你要是打算上手这个细胞，有几个事情得提前知道。
其贴壁能力极为薄弱, 处于半悬浮状态。你来更换个液体时, 要是稍微增大吹打的力度, 细胞搞不好就会消失不见。我一开始进行培养时, 在一周之内就弄丢了两瓶之多。随后吸取经验变灵活理智了, 更换液体之际动作得轻柔, 如同端着刚从锅中盛出的汤那般。
生长速率既非快速亦非缓慢, 然而极易遭受环境之影响, 培养基内的那个细胞因子的配比, 每个实验室皆存有自身的心得体会, 不过通用性的建议是, 血清须挑选优质的批次的, 切莫节俭那么些 Money。
在进行冻存之际要特别予以悉心留意, 在开展复苏之时同样要格外加以小心对待。SET2对于DMSO耐受能力处于一般水平, 当复苏过后要是活力呈现出较低状态, 那就得给予它一些时日来进行恢复, 切不可着急忙慌地去开展实验。我存在过一次由于着急使用的情况, 在复苏的第二天便进行铺板给药操作, 然而最终在第三天所有样本都死掉了, 白白耗费了一周的工作成果。
用它做出来的数据，到底能说明什么
此问题实际上颇具敏感性, 我曾目睹部分研究生, 运用SET2开展了一系列实验, 随后径直断定称“某某药物对成人急性巨核细胞白血病具备有效性”。该怎么表述呢, 源自单细胞系的数据, 至多仅算是“初步的、具提示意义的”成果。
即便SET2堪称经典至极, 然而其仅仅源自于某一个就诊患者。你凭借它筛选出来的那些事物, 最为妥当的做法是选用其他与之相关的细胞系或者原代样本去核验佐证一番。就像MEG - 01、CMK这类, 能够将它们聚合在一起开展一次对比, 如此一来说服力便得以提升了。
事实上, 搞科研最惧怕的便是, “凭借某一个细胞系硬是成就一篇论文”, 这般操作在十年之前还算可以, 然而到了当下, 就显得不太能入眼了。
我个人的一点感受
最终来讲, SET2这个细胞系, 宛如你工具匣内所需的一把专用螺丝刀。平常的时候或许并不会经常运用, 不过一旦你真碰到那颗非得依靠它才能解决的螺丝之际, 你便会欣喜自己手中持有它。
针对成人急性巨核细胞白血病这一病症, 患者数量并不多, 相关的研究同样不多。然而恰恰是因为其数量少, 才愈发显得重要。对于每一个愿意在这个特定方向深入钻研的人而言, 手中都应当持有这么一套实实在在靠谱的模型。
倘若你正有所考虑在运用SET2, 我提议你得先前往文献当中瞧瞧其与你所研究的问题实际上契合与否。千万别只因它“听着貌似正确”便径直采用, 需花费一些时长去领悟这一细胞的生物学相关背景, 后续当你开展实验之际将会省去超多的困扰。
反正我是吃过亏的。
