讲真的, 当我头一回听闻“PCR试剂盒”这个东西之际, 脑海之中仅有两个字——厉害。然而倘若你询问我它究竟是怎样运作的, 恐怕我只会傻兮兮地笑。
后来干这行了,才慢慢摸到点门道。
其实也没那么玄乎。
你仔细琢磨体会一下, 病毒这东西, 小到那种程度, 小到即便使用显微镜去观察都颇费周折, 那怎么去测量检测它, 它得呈现出本来面目才可以。PCR试剂盒所做的事情, 说白了就是这样一种情况, 就是把病毒所含有的那一部分遗传物质, 如同复印机那般, 快速地、接连不断地复制出几百万倍之多, 复制到多到那种程度, 多到你能够察觉到发现它的地步。
在此进程当中, 存在着一种情形, 它颇为类似在众多沙子中间去寻觅一颗金子, 倘若凭借你的肉眼是无法看见的, 那么便借助磁铁去吸附, 而PCR实际上就是那块能发挥吸附作用的磁铁。
为啥有的试剂盒准,有的不准?
这问题我琢磨了大半年。
起初的时候, 我心里觉得, 那价格贵的可不就是好点儿的。之后, 却发觉, 根本不是这样的情况。PCR试剂盒的关键所在, 实际上总共就有三样东西哟: 引物, 这是其一;酶, 这是其二;温度控制, 这是其三。
引物, 其作用如同“导航”一般, 它必须要精准无误地寻找到病毒基因上特定的那一段, 这恰似钥匙准确无误地插入锁孔一样。一旦找对了, 后续的一切就都较为顺利;倘若找偏了, 那么测出来的结果就是“假阴性”, 也就是明明已经呈阳性了, 然而结果却显示为阴性, 你说气不气人呢?
仍旧是那个酶, 娇气到了极点。假使温度高些, 那是不行的, 倘若温度低些, 同样是不行的。存在不少价格较为低廉的试剂盒, 其中酶的活性欠佳, 放置几个月时间就报废了, 如此测出来的结果, 你怎敢去相信呢?
最让人头疼的——污染问题
干过实验室的都知道,PCR最怕什么?污染。
你费尽心力提取的样本, 然而操作台没擦拭干净, 要不然手套不小心遭遇触碰, 这下可好, 先前的工作全白费了。并且PCR试剂盒灵敏度过于高, 一点点污染便能成就一个“假阳性”。
那时, 我有一位朋友, 刚踏入行业之初, 接连三次出现阳性对照跑出的情况, 经检查, 却是那个移液枪的枪头未曾更换, 这一来, 气得他险些将PCR仪给砸坏了。
所以, 别瞧那试剂盒体积微小得出奇, 然而操作遵循规范才是最根本的基础功夫。哪怕是价格高昂至极的探针, 也经不住使用之人全然疏忽上心。
保存温度这事儿,千万别马虎
在PCR试剂盒之中的那些处于核心位置的部件, 好多都得处在温度最低达到零下二十摄氏度甚至是零下八十摄氏度的环境里待着, 你把它从冰箱当中取出来, 放置在室温环境下长达半小时, 之后再把它放回到冰箱里, 如此这般来回折腾几次, 里面所含有的酶就会停止工作了。
有些人把试剂盒放置在桌上整一日, 下午去跑实验, 结果全然无信号, 老板目睹此番情景, 脸色瞬间变绿。
这就如同你把冰淇淋从冰箱当中取出来, 它化掉之后又被冻起来, 然后在再去食用时就已经不是原本那种味道了, 试剂盒同样如此, 是同一个道理啦。
那怎么挑一个靠谱的PCR试剂盒?
说实话,市面上的牌子五花八门,谁都说自己好。
我的经验是——别光看广告,看数据。
首先, 瞅灵敏度, 也就是它能够检测出最低是多少拷贝数的病毒,数字越小越厉害。
第二个, 查看特异性, 这个东西会不会与其他病毒产生反应呢, 比如说检测新冠病毒的情况下, 结果却和流感病毒也相结合了, 如此一来就会陷入混乱状态了。
再有, 瞧重复性, 针对同一样本进行三次测量, 其结果是否保持一致? 要是三次所得结果存在较大差异, 那就得尽快更换。
此外, 最好去询问一下那些使用过的人。网络上把其吹捧得极其夸张, 可这还比不上实验室里的某一句话。
最后说点实在的
这PCR试剂盒此物, 讲复杂便复杂, 说简单亦简单 , 它是个工具, 工具好不好使, 关键在于你怎样去用。
好像你购置了一台单反相机, 即便镜头堪称优质, 然而倘若不懂得进行构图, 并且不晓得怎么去调整参数, 那么拍摄出来的照片反而比不上手机拍摄的效果。
那么, 不要只一门心思去买那价格最为高昂的、标识着最 “高级” 的试剂盒。要将人员予以完善的培训, 使其操作符合规范, 这比任何其他方面都更具强效。
倘若下次再有其他人跟你提及PCR试剂盒是多么神奇, 你不妨仅是微微一笑——它不过就是个放大镜而已, 只是这个放大镜, 能够看见生命的秘密。
挺酷的,不是吗?