今天不扯理论，直接聊点实在的。
在实验室里面放着的PCR仪, 每天都是一副嗷嗷待哺的样子, 试剂盒对于它而言就是赖以生存的口粮。可是要是口粮不合适，那么实验就会出现失败的状况。
我见过太多人，上来就迷信贵的、迷信进口的，结果呢？
扩增效率呈现出低下的状况, 非特异性条带纷纷扬扬到处都是, 最终跑了七八块胶, 却什么结果也没有跑出来。
气不气？当然气。
但问题究竟出在了哪里呢? 通常来讲, 并非仪器存在问题, 也不是你手部摇晃, 而是那个被称作“通用型PCR试剂盒”的东西选择错误了。
通用型到底“通用”在哪？
很多人听到“通用型”三个字，就以为是个万金油。
带着那些齿痕彼此各异的, 你家的钥匙、车的钥匙、办公室的钥匙, 一同挂在一个钥匙扣上。通用型试剂盒, 对大多数模板和引物能适配, 然而并非“全部”。
它解决的是：
你手头的模板, 从细菌的基因组进行转换, 变为人类的血液DNA, 或者是从质粒进行更换, 换成cDNA。
你不需要重新优化镁离子浓度、dNTP配比、退火温度。
省事儿。
但不是万能。
关键词是：兼容性，不是全能。
为什么你的PCR老失败？
不一定是试剂盒垃圾，也可能是你对它期待太高。
我们实验室以前有个实习生，天天吐槽试剂盒辣鸡。
随后我瞅了瞅他所编写的程序, 其中退火温度被设定为52℃, 针对那GC含量达70%的模板进行操作, 最终扩增出来的结果竟然全部都是引物二聚体。
我问他：“你看了说明吗？”
他说：“啊？这还要看？”
……沉默。
通用型试剂盒的最大价值，是给你一个“平均最优”的起点。
但不是无脑操作。
怎么判断一个通用型PCR试剂盒算“好”？
先别急着看价格，也别看牌子。
先看这三点：
第一，它的酶是什么修饰的。
用于热启动的酶, 基本上已然成为标配了。要是不存在热启动这种特性的, 那就直接不予考虑, 否则在室温环境下进行配制体系的那短短几分钟时间里, 引物自身就会引发状况了。
第二，它的buffer配方。
有的试剂盒里的buffer添加了增强剂, 像甜菜碱以及DMSO类似物这种, 适宜用于扩增复杂模板, 有的则是基础配方, 扩增普通片段尚可, 一旦碰到GC rich就会直接失败。
第三，它的保质期和运输条件。
别笑，我真收到过冰袋都化了、酶活性早就崩了的试剂盒。
便宜没好货？不一定
以前我也觉得，PCR试剂盒嘛，贵肯定有贵的道理。
后来被现实教育了。
有一个属于进口的大牌, 对于一支有着50μL反应体系的出品而言, 其成本能够达到七八块, 至于效果, 也就那样罢了。
反观某些国产品牌, 那可是卷得厉害, 价格低至三四块钱一支, 然而其扩增效率以及特异性却一点都不差, 没有任何逊色之处。
不是吹国产，是市场真变了。
通用型PCR试剂盒这个赛道，国内早就杀成红海了。
技术壁垒？早就不是核心问题了。
成本控制和服务响应速度才是。
你真正该关心的，是售后和技术支撑
说个真事。
在之前, 我们运用某进口品牌的试剂盒, 出现了些许问题, 而后发送邮件过去, 等待回复, 结果等了三天。
三天啊，黄花菜都凉了。
而后, 更换成了一个国内的品牌, 工程师在微信上, 瞬间就回复了, 并且还通过远程协助, 帮我们判定问题存在于模板浓度方面。
你说这种支持，值不值？
挑选通用型PCR试剂盒, 并非仅仅挑选一件产品, 而是挑选一个能够助力你解决难题的团队。
小提醒：别被“通用”两个字骗了
有一些厂商, 将“通用型”视作一个用于营销的标签, 然而实际上, 其配方与基础型完全相同。
确确实实的通用类型, 应当是于那种宽泛的模板范畴之内, 在引物Tｍ的范围之中, 在片段长度的范围里, 皆都能够维持稳定不变的扩增成效的。
你拿到的试剂盒，至少要能做这几件事：
扩增300bp到5kb之间的片段
模板浓度在1ng到100ng之间都能出带
GC含量30%到70%都能跑出来
做不到的话，就别叫“通用型”了，叫“碰运气型”算了。
写这么多，其实就想说一句话：
别把通用型试剂盒当救世主，也别把它当累赘。
它是一个工具，一个帮你把实验做稳做快的工具。
选对了，省时间、省钱、省头发。
选错了，那就接着熬夜跑胶吧。
希望你的下一次PCR，条带清晰，没有二聚体。
