实际上, 讲真的, 当我最初开始接触生物实验时分, 压根就不清楚原代细胞株究竟是什么东西。
只是觉着, 细胞而言, 具备可养以及可传代的特性, 能够用作实验便可以了。直至有一回, 实验室中的师姐运用稳定传代细胞得出的结果, 无论如何都无法重复得出——老板的脸色瞬间变得铁青。就在那个时候我才察觉到, 某些陷阱, 一旦踩过一回便决然不想再踩第二回了。
原代细胞株到底是什么东西
确切来讲, 是从活体组织当中直接分离获取的细胞, 紧接着马上展开培养。这与那些于培养瓶里历经几十代甚至上百代传代的细胞, 全然不是同一回事。
它们携带着“原生态”的那种味道, 该怎么去形容呢, 恰似最初从土地之中被拔出的萝卜, 同于超市里搁置了一周时间的那个萝卜, 其间的差异是能够凭借肉眼清晰看见的, 原代细胞株在外形姿态、实际功能、基因呈现表达这些方面, 均更加趋近于它们于生物体之内的原本真实情形状态句号。
这东西, 讲珍贵挺珍贵, 讲娇气蛮娇气。培养时条件稍有不合适, 它便跟你耍脸色。然而恰是这般“娇气”, 使它显得那般真实。
为什么你的实验总翻车
我见过太多人了，包括当年的我自己。
大半年的辛苦折腾, 好不容易跑出的数据好看至极, 做出的图表精美到能直接登上封面。然而, 审稿人一句“请用原代细胞验证”, 瞬间让一切崩塌。这是为何呢? 原因在于传代细胞系在历经反复传代的进程中, 早已忘却自身最初的功能用途了。
基因发生突变, 染色体出现畸变, 表型产生漂移……这些词汇听起来颇具专业性, 若将其转化为通俗易懂的表述便是: 你所培养的那些细胞, 已然不再是起初的它们了。这些细胞极有可能已然发生变异, 或者出现退化的情况, 甚至完全更替成了另外一种身份了。
你用一群“假冒伪劣”的细胞做实验，得出的结论能靠谱吗？
原代细胞株的核心优势
基因的表达呈现出更为真实的状况, 你针对某个基因的功能展开研究, 选用原代细胞株, 其表达的水平与在体内的情形基本保持一致, 然而当换成传代细胞时, 却可能出现10倍、20倍这样的差异, 如此一来那你还继续研究什么呢?
存在这样一种情况, 药物反应与人体更为接近, 许多药物在体外实验表现出惊人效果，但一旦进入临床试验便宣告失败, 其中一个原因在于, 体外所使用的细胞同人体内的细胞有着本质区别, 而原代细胞株至少能够协助你筛选掉那些注定会失败的候选药物, 从而节省经费, 也节省时间。
细胞的形态以及功能维持得更为良好, 肝脏细胞所具备的解毒功能, 它亦然存在；心肌细胞所拥有的节律性收缩, 它依旧保留着；那些传个几代便会发生变形的, 着实不行。
但原代细胞株也不是完美的
得说句公道话。
真的是贵得很呐, 操作烦琐程度也是实实在在的烦琐, 并且好多原代细胞株存在生命期限限制, 养着养着它就变得衰老, 然后死掉了, 而你手头所进行的实验却还没完成, 那种焦心忧虑的感觉, 明白其中滋味的人自然都明白。
你若问我是否值得, 我只能讲, 需看你的实验目的究竟是啥。要是仅仅是想发表一篇质量不高的刊物, 拼凑一些数据, 那么传代细胞系并非绝对不可使用。然而, 倘若你希望开展真正具备意义的研究, 期望在细胞层面观察到最贴近真实情形的反应, 那么原代细胞株那是必然的选择。
买原代细胞株要注意什么
莫要热衷于贪图便宜之物, 须知便宜的货品往往难有优质的品质，此一常理无论放置在何地皆具备适用性, 由正规供应商所供应的原代细胞株, 会额外附带详尽的鉴定报告, 其中涵盖纯度方面、活力层面及特异性标记物表达等内容, 而那些毫无相关资质证明、无明确来源说明、无质量保证承诺的三无产品, 一旦购置回来极有可能呈现出的是一堆杂乱无章、毫无条理的物品。
明晰种属以及来源, 人源的细胞, 鼠源的细胞, 猪源的细胞等等, 不同种属的细胞, 特性有着极大差异, 不要买错, 否则整个实验流程都需重新进行。
知晓培养状况, 一部分原代细胞株对于培养基、血清以及培养环境存在特殊需求, 购买之前应当问明白。不要直到到手之后才发觉自己实验室的条件根本无法养活它。
原代细胞株的未来
说实话，这几年技术发展是真的快。
曾经分离原代细胞, 要依靠手工去操作, 效率低到令人咋舌, 一天能够搞定一个样本已是相当不错情形了。如今各类自动化设备, 以及微流控芯片, 还有磁珠分选等等, 技术变得愈发成熟, 获取原代细胞的难度以及成本均在降低。
更有那些 3D 培养、类器官、共培养体系等等, 原代细胞株的应用场景正日益增多, 对于未来的研究而言, 必定会愈发依赖这些更趋近于真实状态的细胞模型, 这并非是在追逐时髦潮流, 乃是科学发展进程中必然产生的结果, 确实不得不承认这一点。
原代细胞株此物, 若真要去较起真来, 讲复杂那也是复杂的, 讲简单亦是简单的。关键就在于你是否确实在乎实验数据之情状如何了。
倒也不管怎样, 我确实是在意的。终究是曾遭受过审稿人的一次驳斥, 所以再没要第二次的念头了。
