说真的，干这行这么多年，踩过的坑比吃过的盐还多。
每一回进行实验却未能成功做出结果, 最先出现的反应便是“我是不是手部发生抖动了”, 然而历经多次反复折腾之后才发觉——。
问题可能出在你买的那盒试剂上。
抗体ELISA试剂盒，听起来是个标准品，对吧？
可是实际情况是, 牌子不一样, 批次也不一样, 存储条件同样不一样, 如此做出来的结果, 会相差得极其悬殊。
我以前也觉得，随便买个销量高的就行。
那样的结果究竟如何呢? 具备的标准曲线如同心电图一般, 背景高得简直超乎想象, 重复性糟糕到令人产生想要砸毁机器的冲动。
那段时间，我几乎怀疑自己是不是根本不会做实验。
而后, 跟一位老前辈展开交谈, 他向我发问一句, “你能够确定你所购买的那个试剂盒, 其抗体是相互配对的吗? ”。
我愣住了。
对啊，ELISA的核心，不就是那对抗体吗？
抗体对，到底有多重要？
诸多的人觉得ELISA试剂盒就是进行加样操作, 之后开展孵育工作, 接着实施洗板行为, 最终进行读数动作, 其流程简单得好似一部傻瓜相机。
然而, 要是你所运用的抗体, 其配对不相符, 且特异性不具备, 同时还不成熟, 那么整个实验便转变成为了玄学。
有的人使用了一款宣称具备“高度灵敏特性”的试剂盒, 然而, 最终竟是连阳性对照都无法达成测试结果, 我曾目睹此情景。
换了个抗体对，同样的样本，信号直接翻了三倍。
差别就这么大。
所以，买试剂盒之前，别光看价格和品牌。
一定要弄明白它那所运用的抗体对源自何地, 是否经历了严谨的交叉反应测试。
别听销售吹得天花乱坠，你得看数据。
批次稳定性，才是真功夫
做实验最怕什么？
不是做不出来，是“上次能做出来，这次做不出来”。
同样的一个试剂盒, 不同的批次, 结果相差百分之三十以上, 此种事情我碰到过不止一回。
特别是在进行那种时间跨度较为漫长的项目时, 前后的数据竟是对不上的状态, 老板还紧追不舍接连追问, 而你所能做的仅仅就是用苦笑来应对了。
所以我现在买试剂盒，会特别留意供应商的批次一致性控制。
有些规模较大的工厂, 尽管价格偏高, 然而人家在每一个批次都会开展质量控制工作, 并且附上详尽的产品分析证书。
多花那点钱，省的是你后面几个月的返工时间。
样本类型，别想当然
另一个容易被忽略的点——你的样本是什么？
血清, 其基质效应与血浆不同, 细胞上清的基质效应又有别于血清, 组织裂解液的基质效应同样和这些不一样, 不同样本的基质效应完全不一样。
同一款试剂盒, 用于血清时状况良好, 当转换至细胞上清中, 背景值瞬间急剧升高。
那次, 我做细胞上清的检测, 运用了某知名品牌的试剂盒, 然而，即便将其稀释了10倍, 结果仍是信号爆表。
后来换了专门适配细胞上清的试剂盒，才搞定。
别偷懒，买之前看清楚说明书上的推荐样本类型。
存储和运输，藏着猫腻
这件事说起来有点气人。
有次我订了一批试剂盒，到货一看，冰袋全化了，盒子温温的。
找客服，客服说“没事，短时间常温不影响”。
我信了。结果做出来数据一塌糊涂。
其后才晓得, 抗体一旦反复进行冻融, 或者长时间处于常温环境下暴露着, 其活性便会呈直线状下降。
所以, 如今每当货物抵达, 我都会首先对包装予以检查, 接着放置于4度的环境中使其固定数个小时之后方才使用。
如果供应商连冷链运输都做不好，那别指望它的产品能有多靠谱。
别只看灵敏度，也要看特异性
很多厂家喜欢标榜“灵敏度超高”，能检测到皮克级别的抗原。
听起来很牛对吧？但有时候，灵敏度越高，特异性反而越差。
因为那些极微弱的信号，可能是交叉反应带来的假阳性。
我存在一位友人, 其购置了一款号称具备“世界最低检测限”的试剂盒, 然而, 在针对健康人血清进行检测操作时, 最终呈现出的结果却是, 其中一大半的检测结果都显示为阳性。
后来换了一个灵敏度略低但特异性更好的试剂盒，结果才正常。
所以，别被数字忽悠，看看它的特异性数据，尤其是跟你样本中可能存在的干扰物有没有交叉反应。
那到底该怎么选？
说实话，没有完美的试剂盒，只有最适合你实验体系的。
先明确你的样本类型和检测目标
看抗体对的来源和验证数据
关注批次稳定性和质控报告
检查存储和运输条件
不要迷信单一指标，平衡灵敏度和特异性
现如今, 我去挑选试剂盒之时, 会更加偏向于那般的供应商, 即那些能够给予完整齐全技术支撑的, 以及愿意主动分享原始数据的供应商。
哪怕贵一点，但实验顺利、数据可靠，那点成本很快就回来了。
毕竟，实验做不出来，才是最贵的。
