这行当,卷的是“通用”
搞检验的朋友,谁没经历过选试剂盒的崩溃?
时而挑样本, 时而挑引物, 时而挑仪器。实验室之中堆放着七八种盒子, 更换一个靶标便需要更换一套流程, 培训新人都得逐个仔细地教。烦不烦? 烦死的。
然而, 偏偏存在着一种物品, 它被称作“通用型PCR试剂盒”, 宣称具备能够凭借一盒达成在各处通行无阻的能力。
是不是觉得蹊跷? 起初的时候我是未曾相信的。哪一个生产厂家不会去吹嘘自身表示“具有广泛适用性”? 真正把它拿回来去进行运行尝试, 结果却完全是凭借着机遇所致。
直到最近,被一个同行按着头试了款——确实不一样。
它真能“通吃”吗?
先说结论:不是玄学,是配方逻辑变了。
以往被称作“通用”的那种情况, 就是添加一种被叫做“通用缓冲液”的东西, 接着让你自行去调节, 其本质实际上仍旧属于半成品。
对于当前的通用型而言, 是要将你平常所见到的那几种样本类型, 也就是血液、组织、唾液, 甚至还有某些保存液, 全部预先处理到它的体系当中。你只要添加模板就行, 它会自动进行适配。
听起来挺玄?其实核心就两条:
酶系统进行了优化, 并非单一的酶, 而是混合酶, 具备有力且稳定的特性, 无惧样本中的杂质干扰。
缓冲溶液之中的离子浓度以及pH缓冲范围被放宽了, 就如同以往仅仅能够行走在狭窄道路之上, 而现如今却能够驾驶越野车辆驰骋。
但有个坑,你得绕开
通用是好,但“通用”不等于“万能”。
有一些厂家, 为了去追求那种全覆盖的效果, 把灵敏度弄得很是保守。这是什么意思呢? 意思就是, 不管是什么样的样本, 都能够进行检测, 然而检测跑完之后, 所得到的Ct值, 要比专用试剂盒所得到的Ct值, 高出两三圈。
需你去做的是科研方面的筛检、初步进行定性, 那样是完全能够满足使用需求的。但倘若你是想要追求那种极致状态下的低拷贝检测, 又或者是去做绝对定量的工作, 那就依旧得回过头借助专用盒来开展。
选通用型,本质上是选“容错率”和“便利性”的平衡。
谁最该用这东西?
我观察下来,三类人最需要:
第一类, 那种样本种类繁多的实验室, 一天要收取几十份样本, 这些样本有血样, 有痰液样本, 还有拭子样本, 需要把它们分门别类地去配置试剂, 搞得手都快要抽筋。通用型的直接一管就能搞定全部流程, 节省的可不是金钱, 而是宝贵的生命。
第二类, 是用于做早期筛查的, 或者是用于大样本初步检测的。并不追求精确定量, 而是先把阳性和阴性排查出来再说。其具备通用性, 通量很大, 流程较短, 一天处理几百份并不费劲。
第三种情况, 是新手。在刚刚进入这个行业, 对于流程尚不熟悉的时候, 最害怕的就是操作步骤繁多, 且变量极大的状况。而通用型方式把变量压缩到最少限度, 仅仅负责加样以及运行程序, 不会出现错误。
但我还是想说句实话
没有完美的试剂盒。
普遍适用的那种, 是舍弃了一部分极致的性能表现;专门用途的那种, 是牺牲了一定的灵活变通性。你来瞧瞧你自身究竟需要的是什么。
假设你所在的实验室每日都在进行同一类样本、同一个靶标的检测工作, 那么就不要进行无谓的折腾了, 因为专用盒会更加稳定可靠。然而, 要是你处于像我们这种情况, 今日检测猪瘟, 明日检测新冠病毒, 而后天又要检测人的某个基因, 那么就有必要准备一盒通用的了。
不是替代,是互补。
买之前,问三个问题
这种具备通用性的类型, 所书写的样本类别究竟是什么呢? 最好挑选那种能够支持“各类”或者“多样”样本的, 千万别购买回来之后仅仅只能用于运行血液样本的检测。
有没有做过不同样本的对比验证?让厂家给数据,别光听销售吹。
价码究竟是不是切实划算呢, 有时通用型鉴于配方繁杂, 反倒更为昂贵, 算清单次成本, 别被“通用”这俩字误导了。
最后一句
PCR这事儿,说难不难,说简单也不简单。
倘若选对了试剂盒, 那么便等同于成功达成了一半。通用型PCR试剂盒, 并非具备所有功能, 但要是没有它, 那可是绝对不行的。
你实验室里,备一盒了吗?