单克隆抗体制备技术最初是由K鰄ler和Milstein(1975)利用B淋巴细胞杂交瘤技术创立的。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，常通过杂交瘤细胞技术进行制备，具有高特异性，往往不需要亲和纯化。B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合可产生既具有分泌特异性抗体又具有在组织培养中无限增殖能力的杂交瘤细胞。通过筛选、克隆和增殖后，可以实现单克隆抗体的工业化生产。
目前该技术已广泛应用于疾病诊断及生物、医学研究、环境和食品安全检测(监测)等方面。单抗均一性高，只和抗原某一决定簇结合，有更高的特异性，而且，产生抗体的单克隆细胞可在体外传代繁殖，不受动物免疫时间限制生产抗体。只要管理和培养技术正确，抗体就可无限的产生。基本过程是动物免疫、细胞融合、克隆筛选、单克隆抗体性质鉴定、腹水诱发、收集和纯化等。
单克隆抗体的制备是一个复杂的过程，主要涉及以下几个步骤：
1. 免疫动物：首先选择特定的小鼠（如6-8周龄的雌性BALB/c小鼠）进行免疫，使用目标抗原刺激其免疫系统，产生针对该抗原的B淋巴细胞。
2. 细胞融合：将免疫后的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合。脾细胞含有特异性识别抗原的B淋巴细胞，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力。
3. 选择性培养：使用HAT选择性培养基筛选出融合成功的杂交瘤细胞。HAT培养基能够抑制未融合的骨髓瘤细胞和脾细胞的生长，而杂交瘤细胞由于获得了B淋巴细胞的HGPRT酶，可以在HAT培养基中存活并增殖。
4. 阳性克隆筛选与克隆化：通过有限稀释法或流式细胞术等方法，筛选出能分泌特定单克隆抗体的杂交瘤细胞，并进行克隆化培养。
5. 单克隆抗体的大量制备：
- 体内诱生法：将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔，诱导产生腹水，收集腹水中大量的单克隆抗体。
- 体外培养法：在培养基中培养杂交瘤细胞，收集培养上清液中的单克隆抗体。
6. 抗体纯化：使用硫酸铵沉淀法、凝胶过滤、亲和层析等方法纯化单克隆抗体，确保其纯度和活性。
7. 抗体鉴定与保存：通过ELISA、Western Blot等方法鉴定单克隆抗体的特异性、亲和力和效价，并在适当的缓冲液中保存，如-80°C的PBS溶液中。
整个过程需要精确的操作和严格的无菌条件，以确保获得高纯度、高特异性的单克隆抗体。此外，单克隆抗体的制备成本较高，主要因为其制备过程复杂且需要多次筛选和纯化。
