胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）是在生物医学研究和细胞培养中广泛使用的重要生物制品，它含有丰富的生长因子、蛋白质和其他生物分子，对细胞生长和增殖起着至关重要的作用。制备胎牛血清是一个复杂的过程，通常由专业的生物制品公司进行，以确保其质量和纯度。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时，将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉采血。和新生牛血清相比，胎牛血清显然产量低，成本高。
胎牛血清在细胞培养中是至关重要的，它能提供必要的营养成分和生长因子，促进细胞生长和维持其健康状态。
在制备胎牛血清时，应遵循以下步骤：
一、完全培养基配制
比例：通常，50mL的完全培养基可以由450mL DMEM（89%）+50mL胎牛血清（10%）+5mL双抗（1%）组成。
注意：确保所有成分都经过无菌处理，避免污染。
二、细胞冻存液配制
比例：冻存液的配制通常遵循6：3：1或7：2：1的比例，具体为培养基：血清：DMSO。例如，对于存活率高的细胞系，推荐使用7：2：1的比例。
调整：对于存活率低的细胞系或需要长期保存的细胞系，可以适当增加血清比例。
三、使用注意事项
1. 避免反复冻融：血清解冻后，应立即使用，或在28℃储存不超过6周。如需长期储存，应分装并重新冻存。
2. 沉淀处理：血清中出现的沉淀物通常是脂蛋白变性或血纤维蛋白凝集所致，不影响血清质量。可将血清分装、离心去除沉淀，但不建议直接过滤，以免阻塞过滤膜。
3. 解冻方法：将血清从10℃至20℃冰箱取出，先置于2～8℃冰箱融解，再室温完全溶解，避免直接放置于37℃，以减少沉淀形成。
4. 避免极端温度：血清在37℃放置时间过长会导致浑浊，影响质量。
5. 热灭活：除非必要，不建议进行热灭活，因为这可能增加沉淀物。
6. 无菌操作：确保所有操作都在无菌条件下进行，以防止细菌污染。
四、存储与解冻
储存温度：未拆封的血清应存放于10℃至20℃。
解冻过程：逐步从低温至室温，避免快速解冻造成蛋白变性。
避免极端温差：从冷冻直接至室温或高温，易导致沉淀形成。
五、质量与品牌选择
品牌：Gibco、Hyclone、Corning等品牌因其质量稳定而受青睐，但价格较高，且可能因供应限制而短缺。
国产与进口：国产血清价格便宜，但质量参差不齐，需谨慎选择有质量保证的品牌。
真伪辨别：注意正品渠道，避免假冒产品，检查生产厂家认证、农业部认证、进境检疫许可证等。
六、经济与用量考虑
经费充足：选择最贵但质量最好的品牌。
经费有限：尝试二线品牌或在大品牌打折时购买。
大用量：考虑性价比较高的二线品牌，或在大品牌打折时批量购买。
国产与进口：根据实验室需求和预算，权衡性价比，同时关注血清颜色和透明度作为质量参考。
七、购买建议
正规渠道：通过官方或授权渠道购买，确保血清质量和可溯源性。
试用比较：对于初次使用的品牌，可以先购买小量试用，比较不同品牌的效果。
通过以上步骤和注意事项，可以确保胎牛血清的正确制备和使用，从而支持细胞培养的顺利进行。
