细胞换液是指在细胞培养过程中，定期或在特定情况下更换细胞培养基的过程。这一操作对于维持细胞的健康生长至关重要。在细胞换液过程中，避免细胞损伤需要从操作技巧、环境控制和换液策略等多方面进行综合管理。以下是关键注意事项：
一、操作技巧优化
轻柔操作：换液时需沿培养瓶壁缓慢加入新鲜培养基，避免直接冲击细胞层。使用低吸力移液器吸除旧培养基，减少对贴壁细胞的机械剥离。
无菌规范：严格遵循无菌操作，使用一次性无菌吸管和移液器，避免交叉污染。操作前需对超净台、培养瓶口及双手进行酒精消毒。
温度控制：新培养基需预热至37℃后再使用，避免温度骤变导致细胞收缩或凋亡。
二、换液策略调整
频率选择：根据细胞类型调整换液频率。原代细胞建议每2天换液一次，iPSC/ESC需每日换液，而单细胞克隆可每3-4天换液。
特殊处理：
低密度细胞换液时保留部分原培养基（如1/3体积），减少环境刺激。
分化或转染阶段减少换液频率，或使用条件培养基（如补充生长因子的上清液）。
三、环境与耗材管理
设备维护：定期清洁培养箱和水浴锅，避免微生物滋生。
耗材质量：使用高压灭菌的玻璃器皿或无菌包装的一次性耗材，确保无内毒素残留。
四、常见问题规避
细胞脱落：若换液后细胞脱落，需检查操作是否过于粗暴，或培养基pH值是否异常。
污染风险：若培养基浑浊或颜色异常（如变黄），需立即排查污染源并更换培养液。
通过以上措施，可有效减少换液过程中的细胞损伤，维持细胞健康状态。
