抗体的保存状态直接影响其活性和实验效果。不当的保存条件可能导致抗体变性、聚集或活性下降，从而影响实验结果的准确性。当ELISA试剂中抗体保存状态异常，导致标准曲线R²值低于0.98或质控样品CV值>10%时，可按照以下步骤进行排查和处理：
一、标准曲线R²值异常的解决方案
1、检查抗体保存条件
确保抗体保存在推荐的温度下（通常为-20℃或-80℃）。
避免反复冻融，分装使用，每次使用后立即放回原位。
使用避光容器保存荧光抗体，防止光淬灭验证抗体活性。
2、验证抗体活性
通过加标回收率测试：在样本中添加已知浓度标准品，计算回收率。若回收率超出80%-120%，提示抗体可能失效。
检查显色反应：若标准品前4孔无梯度显色或最大OD值<1.2，需重新溶解标准品或更换抗体。
3、优化实验操作
确保标准品完全溶解（离心后低速涡旋混匀），避免未溶解颗粒影响曲线拟合。
校准移液器，避免加样误差导致浓度梯度异常。
二、质控样品CV值过高的处理方法
1、排查操作误差
检查移液器是否校准，加样时避免液体挂壁或气泡产生。
使用自动洗板机确保洗涤均一性，手工洗板需注满每孔并拍干。
2、评估抗体稳定性
若复孔间CV值持续>10%，需检查抗体是否因保存不当（如温度波动）导致效价下降。
通过批内、批间精密度测试验证抗体长期稳定性。
3、更换试剂或调整方案
若抗体已过期或保存条件不符，立即更换新批次试剂。
对高浓度样本进行预实验，确定最佳稀释倍数，避免超出检测范围。
三、预防措施
严格遵循保存要求：抗体分装后避免反复冻融，使用前平衡至室温。
定期质控：每批次实验前通过标准曲线和质控样品验证试剂性能。
抗体保存状态异常的处理应从检查保存条件、评估抗体状态、调整保存方式等方面入手。通过合理的保存和处理，可以最大限度地保持抗体的活性和稳定性。通过以上步骤，可有效解决因抗体保存异常导致的ELISA结果偏差问题。
