ELISA试剂盒铺板是指将实验所需的试剂，包括标准品、样本、抗体等，按照特定的顺序和量加入到酶标板（微孔板）的各个孔中，以便进行后续的免疫反应和检测。ELISA试剂盒在完成加样（铺板）后，需要立即进行以下关键步骤：
1、立即孵育
加样完成后，应立即将酶标板放入恒温培养箱中进行孵育。孵育时间需严格控制，通常为37℃孵育1-2小时（具体时间以试剂盒说明书为准）。孵育过程中需确保微孔板密封，避免液体蒸发或污染。
2、密封酶标板
孵育前需用封板膜或封板覆膜密封酶标板，防止液体蒸发和外界污染。密封后需轻晃酶标板使液体混匀，但避免产生气泡。
3、避免触碰板底
操作过程中需避免用手或其他物品触碰酶标板底部，以免影响实验结果。孵育时需将酶标板单独放置在平坦表面上，切勿叠放或多板堆叠。
4、后续洗板与检测
孵育结束后，需进行洗板（通常洗涤3-5次，每次静置30秒），随后依次加入检测抗体、酶标二抗、显色底物和终止液，最终用酶标仪读取OD值。
5、注意事项：
所有试剂使用前需平衡至室温。
加样时需更换枪头，避免交叉污染。
显色反应需避光，终止后需立即读数。
以上步骤可确保ELISA实验的准确性和重复性。具体操作请以您使用的试剂盒说明书为准。
