PCR试剂盒，是分子生物学实验室经常会用到的一种工具，它，主要是用来扩增某种特定的DNA片段的。去挑选一款恰当合适的试剂盒，这可是能够直接对实验结果的稳定性以及重复性产生影响的。下面，我会从实际操作的这个角度出发，来分享三个在选购以及使用过程当中的关键要点。
PCR试剂盒如何选择
市面上PCR试剂盒品牌数量不少，各品牌组分存在差异。关键得看酶的类别，普通Taq酶适宜常规扩增，高保真酶适用于要测序的片段。还需留意buffer里镁离子的浓度，有些是预先混合好的，有些得自己去调整。建议依据你常做的模板类型以及片段长度来确定，像复杂模板可选择添加了增强剂的版本。
PCR试剂盒使用注意事项
从冰箱取出试剂盒后，要确保其完全融化且充分混匀，不过不能进行剧烈振荡，不然会致使酶蛋白起泡变性。通过分装进行保存，能够减少因反复冻融而造成的活性下降情况。在配制反应体系的时候，建议于冰盒上开展操作，并且在最后才加入模板以及酶。此外，每个试剂盒都具备推荐的程序参数，退火温度能够先从说明书所建议的值着手开始，借助梯度PCR去寻找到最优条件。
PCR试剂盒常见问题
扩增不出条带是最为经常碰到的情形，先来查验一下模板质量以及引物设计，接着再去确定试剂盒各个组分是不是依照比例添加的。要是出现了非特异性条带这状态，能够试着提升退火温度或者减少延伸时间。引物二聚体通常跟引物设计或者镁离子浓度偏高是有关联的。建议每一次实验都带上阳性对照以及阴性对照，以此方便能够快速找到问题所在之处。
可显著提升实验效率，就要选择适配的PCR试剂盒并且规范地去操作。你在运用PCR试剂盒之际碰到过什么样稀奇古怪的结果呢？欢迎留言一块儿交流。
