在基础生物学研究里，大鼠原代细胞起着关键的作用，它最大的优势为何呢？在于保留了体内细胞原本的特性以及生理功能。跟传代细胞系不一样，原代细胞更接近活体的状态，能够真切地反映出组织微环境里的信号响应和代谢行为。
大鼠原代细胞分离技巧
获得高质量的大鼠原代细胞，组织取材属于首要步骤。一般会挑选幼年大鼠来获取具备更高活性的细胞，解剖进程要于无菌环境里迅速达成，防止组织干燥或者遭受污染。运用预冷的平衡盐溶液反复去漂洗组织块，在去除血液和结缔组织后，借助眼科剪把它剪成大概1立方毫米的小块。
随后运用酶消化法来分散细胞，对胶原酶与胰蛋白酶的配比来说，得依据靶组织类型予以调整，肝组织通常采用IV型胶原酶，然而肺组织却推荐混合酶体系，消化温度要严格把控在37℃，每隔5分钟需轻轻摇动一回，等到组织块基本消失后要马上终止消化，防止过度损伤细胞。
大鼠原代细胞培养注意事项
经200目滤网过滤后的细胞悬液，要去除未消化的碎片。离心转速建议控制在每分钟800至1000转，时间为5分钟，因为转速过高会挤压细胞膜造成不可逆损伤。重悬时需使用含10%胎牛血清的专用培养基，还要加入双抗抑制细菌生长。
关键的还有培养皿表面预处理，大鼠原代细胞贴壁能力是比较弱的，推荐运用多聚赖氨酸或者胶原包被的培养瓶，接种密度维持在每平方厘米5×10^4个细胞的样子，过密的话会致使接触抑制，过稀的话则会影响细胞间信号通讯，放入培养箱之后前24小时要尽可能避免移动，这有利于细胞稳定附着。
大鼠原代细胞鉴定方法
把细胞分离培养之后，就一定要去验证细胞的纯度。对于细胞纯度判断而言，形态学观察是最为基础的一种方式：成纤维细胞呈现出长梭形的样子，而上皮细胞是多个多边形铺路石状的居多。可是只凭借形态是没办法确保准确性的，建议结合免疫细胞化学染色，利用波形蛋白或者角蛋白这样的组织特异性标志物来进行标记。
可提供更客观定量数据的是流式细胞术，取少量细胞，固定后孵育对应抗体，上机检测，阳性率超过90%才可用于后续实验，此外，功能学鉴定也不可忽视，比如肝细胞要检测白蛋白分泌量，神经元要验证动作电位发放能力，只有多重验证通过的原代细胞，才能支撑可重复的科学结论。
