将机体组织直接分离并予以培养从而形成的细胞群体构成为原代细胞株，它最大程度地留存了来源组织的生物学特性。原代细胞株异于永生化细胞系，它更为贴近体内的真实状况，所以在基于基础研究以及药物筛选等之类的场景当中具备着不可替换的价值。而理解它的获取方式以及培养方法，乃是实验成功的首要步骤。
原代细胞株怎么提取
对于提取方法而言，其取决于组织类型以及细胞特性，常用的机械分离法适宜于疏松组织，借助剪切或者研磨的方式来把组织予以分散，酶消化法则是依靠胰蛋白酶、胶原酶等去分解细胞外基质，在实际操作的时候常常会把两种方法进行结合，就像先把组织剪碎然后再使用酶液加以处理，整个过程需要在无菌环境里快速达成，从而避免细胞活力出现下降。
经提取后得到的细胞悬液，要将其中的杂质以及死细胞予以去除。把离心清洗当作基础步骤，然而借助密度梯度离心或者特异性抗体磁珠分选能够进一步提升纯度。针对于贴壁依赖型细胞而言，在接种至培养瓶之后，需要静置一段时长，从而让细胞得以充分附着。记录每一次提取时的细胞得率以及活力，这对优化后续方案是有帮助的。
原代细胞株培养难点
新分离出来的细胞株对于环境产生种种变化的时候是极其敏感的，培养基当中所含有的成分呀，其pH值呢，还有渗透压以及温度若出现稍微有那么一点偏差的情况，就会实实在在地对其生长造成影响。一般而言是需要在基础培养基里加进去10%-20%的特制血清的，并且还要补充生长因子以及激素。不相同的细胞类型存在着特殊的需求，比如说内皮细胞是需要添加VEGF的，而神经元呢则是需要B27添加剂的。
存在着另一大挑战，此挑战为污染控制。原代细胞株欠缺抵抗力，一旦遭受细菌污染，或者受到真菌污染，又或者出现支原体污染，均将会致使实验走向失败。要在生物安全柜里开展操作，要运用无菌耗材，并且要于培养基之内添加双抗。需定期对细胞形态予以观察，要是出现颗粒状增多的情况，又或者出现漂浮物增多的情况便需要及时检测污染源，还要及时处理污染源，是这样的吗。
原代细胞株的应用价值
因为保留了供体的遗传背景以及功能特征，所以原代细胞株能够更真切地反映药物反应还有毒性效应。在化合物筛选期间，运用原代肝细胞能够评估药物代谢途径；借助原代肿瘤细胞则可以预测个体化治疗方案的有效性。这些数据比永生化细胞系更具备说服力。
存在于组织工程以及再生医学研究里头的原代细胞株，有着至关重要的作用。借助三维培养进而造就出类器官模型，能够对体内微环境予以模拟。尽管其具有培养周期不长、长久下去难以顺利传代的状况，然而它自身具备的独特生理相关性，使得它变成了从基础发现朝着应用转化的关键桥梁。要是能够掌握规范的操作流程，那便可以让这一工具的价值得到最大值的发挥。
