上周隔壁实验室的小张发了一条朋友圈:
“第四盒了,全是杂带。我要辞职。”
配图是一张跑胶图,烂得连marker都不忍心看。
下面评论清一色的“我们也是”“抱抱”和“换吧”。
没人问他要不要帮忙分析方案。
因为大家都懂。都懂。
为啥非要买通用型
你可能也问过自己。
省钱当然是一个理由。但更真实的,是懒。
不,不能这么说,是效率。
实验室一个月配一次PCR体系的日子,早就过去了。
现在各个方面都追求速度要快,身为老板的人催促着要数据,需要去补充图片的论文摆在面前,如此这般情况下,你怎么会拥有时间逐个地去摸索各种条件呢?
通用型的好处就是,一管预混液,加模板和引物就上机。
库存也从七八种专用试剂,变成一两盒通用型搞定。爽不爽?
但它真的万能吗
别急着掏钱。先泼一盆冷水。
有一篇文章针对这个进行过专门的剖析,通用型所具备的适用范围十分广泛,然而在那些包含复杂样本的情形当中,极易出现状况。
敏感度不如专用型。特异性也得赌运气。
特别是低浓度的样本,像是您费尽心力提取出来的那部分 RNA,当通用型无法做出来之际,您或许会觉得是自身的问题。
但实际上,是试剂盒的问题。
我最怕的一种情况
仪器数据都跑完了。
上机一看,对照正常,样本全没起线。
怎么回事?加样错了?引物没配对?还是——这盒试剂不行?
然后你开始排查,一个问题花三天。
最后发现,就是试剂盒的问题。
那种浪费了时间、样本、钱却没法怪任何人的感觉……
糟透了。
到底怎么挑
说点实在的。
搜了一圈资料,总结几条:
瞧一瞧稳定性如何,也就是批次之间的差异是不是很大,要是换个批号之后曲线就发生变化,那就尽早把它丢弃掉。
去看那抗干扰的能力,环境样本或者粗提模板之中,多多少少是会带有一些杂质的,而品质优良的通用型是能够承受得住的。
瞅瞅性价比,单次反应所产生的成本,国产的初步估算在8块至25块这个区间范围之内,至于进口的嘛……算了,不说它了。
那些实验室才懂的糟心
有一次我同时买了两盒。
同一品牌,不同批次。
一个跑出来漂亮得像教科书,另一个曲线歪到怀疑人生。
拨打了电话去询问厂家,客服表现得十分礼貌,说道:“亲,这一批次的质检报告表明各项参数都是没有问题的哦。”。
参数没问题。所以呢?是我的问题?
之后呢,又碰到了更离谱的情况,缓冲液的配方发生了改变,然而包装上面却没有写明,说明书也没有进行修改,一直等到你跑完之后,这才察觉到了不对劲之处。
这些坑,只有做过的才懂。
一个小技巧
每次拿到新批次的盒,先做一次测试。
用你最熟悉的那对引物,最好的那批模板,跑一次。
对比曲线和上一盒。如果差别大,别犹豫,退货。
别等样本做完了才发现。
别迷信“通用”这两个字
“通用”不等于“适合你的所有场景”。
做一些低丰度基因的时候,还是换专用型的吧。
通用型就如同瑞士军刀那般,它具备着能够做各种事情的能力,然而当把它和专业菜刀相比较按照切菜这一用途来衡量时,它确实还是存在着一些不足之处的。
有篇分析也是这么说的:在关键检测里,通常专用型更靠谱。
做不出结果省那点钱没意义。
最近发现的一款
前两天试用了一个新牌子。
其上标注着能够检测到处于单拷贝级别的情况,当然啦,我内心对此是存有一些怀疑的,然而呢,待跑完之后查看一番,最终发现那曲线确实足够明亮。
还有一个具备dUTP防污染功能的,以往未曾予以留意,自一次整间实验室皆被气溶胶污染过后,方才知晓其重要性。
现在不管三七二十一,但凡带防污体系的,先加分。
说说价格的事
那个价格对比表,是你们老板在组会上多次着重强调要仔细查看的,对吧?
大牌子的确贵,但稳定。国产的这几年也跟上来了,性价比不错。
有个榜单做过统计,像上海研生、诺唯赞这类,其技术服务做得相当不错,不太容易出现让你等待回电三天却毫无回音的情况。
预算够买好的。不够,也至少找靠谱的。
最怕为了省钱买谁都没用过的。
最后的碎碎念
写这么多,其实就想说一句:
试剂盒仅仅是工具而已,不要让其成为你所进行的实验出现阻碍这种情况出现,并且也不要让它去承担本不应该由它来承担的责任。
搞坏的验证好。稳定做的就别折腾换了。
搞科研并非那般玄乎莫测,然而实则也并非那般具备标准模式化,在购买之前要多多去询问,在使用之前要多多去测试,如此做法要比其他任何事情都更具优势。