我就是那种，选试剂盒选到崩溃的人。
你知道吗，上个月我又废了一批样本。
96T规格的坑
买了96T的盒子。
心想做得准一点，多设几个复孔。
结果呢，浪费了将近一半的孔位。都是钱啊。
灵敏度的陷阱
第一次用0.78 pg/mL灵敏度的那个小鼠盒子。
说明书上写得天花乱坠。
结果测出来的数值和空白差不多。
我差点以为是自己的实验出了问题。
后来才知道，有些试剂盒的灵敏度就是个文字游戏。
关键要看动态范围。低浓度样本需要高灵敏度的。
这是我花了三个月长的记性。
样本类型
血清、血浆、组织匀浆。
不同的试剂盒兼容性不一样。
有的在你样本里就不好使。
买之前一定问清楚。
重要的话说三遍。
有这么一种双抗体夹心法的 ELISA，先是要将捕获抗体包被于板子之上，之后呢，再去添加样本以及标准品。
操作上算是最成熟的一种了。
但就怕交叉反应。
跟HHG几个同源蛋白长得太像了。
特异性表格一定要看。
标准品的故事
稀释标准品那一步，最崩溃。
倍比稀释，配7个梯度浓度。
高浓度的标准品，其浓度为10ng/mL，接着，按照依次2倍的幅度进行稀释，一直稀释到了0.157ng/mL。
你以为很简单？
错一个孔，整条标准曲线就废了。
上次我配完跑出来的曲线R值才0.92。
重新来过吧。
做科研就是这样，重复，重复，再重复。
批次差
批量订购了一批试剂盒。
第一批用着挺好的，很稳定。
第二批到货后，测出来的数值突然低了20%。
批次间差异超过了10%。
厂商跟我说是正常现象。
正常。
我呵呵了。
供应商的靠谱程度
第一次买到一盒没有任何质检报告的盒子。
包装还挺漂亮的。
结果抗体活性不够。
打电话问客服，客服跟我说“大概是运输过程中温度波动”。
大概是...
我想骂人但忍住了。
后来学乖了，只买能提供COA和质检数据的厂家。
ISO认证什么的虽然繁琐，确实让人多一份安心。
储存的教训
2-8度保存，千万别冻。
但有些组分是需要-20度的。
比如冻干标准品，开封后要密封存放在-20度。
我以前不知道，所有东西都塞进4度冰箱。
抗体失活得差不多时，才慌慌张张找原因。
你猜怎么着？
说明书上早就写了。
但我没仔细看。
温度平衡
从冰箱里拿出来直接就用。
这样做过一次。
后来才知道，所有试剂要在室温平衡30分钟。
温度差会让抗原抗体结合出问题，结果全乱了。
这个细节很少人会在产品介绍里强调。
ELISA的反应所需时间，传统方式是四至五小时，而快速类型的则能够在一百二十分钟内完成。
我赶时间的时候会用快速版。
但说实话，快速版的灵敏度和稳定性有时候不如传统版。
这也是要提前权衡的地方。
隐形的那面墙
你不觉得吗？
做实验的人选试剂盒，就像是在做一场看不到对手的博弈。
厂商和用户之间的距离，比想象中远得多。
当中隔着一个极大的黑盒子，这黑盒子就是销售渠道，你始终都没法知晓该产品究竟好不好用，也不清楚会在哪个环节出现问题。
售后
有的厂商会让你填一堆表格、发邮件、等三天。
三天后黄花菜都凉了。
样本都降解了。
有些厂商根本联系不上。
所以我现在买盒子之前，会先打客服电话测一下反应速度。
秒回的那种才敢下单。
抄作业也没用
以为看大佬用什么牌子就跟着用什么。
结果发现。
那个人家用的那个品牌，有关其样本类型方面是做过验证的，然而在我这儿是未曾做过验证的。
样本类型不一样，结果能差出两条街。
抄作业也得看题目。
最近在做软骨细胞分化的实验。
IHH这个指标有多难测？
浓度低到你要用pg/mL级别的盒子。
人IHH的试剂盒范围是1.56到100 pg/mL。
这个数量级，稍微有半点操作误差，结果就漂了。
还怎么相信数据？
实验之外的声音
我妈说。“你天天待在实验室做这些有什么用？”
我说。
我正在聚焦着重关于骨骼发育方面的研究工作，或许在往后诸多时间流转之后，会有人缘由于我们当下所获取到的某一个数据，从而减少经历那几年的曲折探索路程。
采购的无奈
采购那边只管砍价。
他们对试剂盒质量一窍不通。
每次我写申购单都像打一场仗。
要把选型理由写得清清楚楚。
为什么这个牌子好？为什么不能买便宜的那个？
这些都是字面意义上消耗在实验室里的时间和心力。
TMB显色那一步。
从无色到蓝色，然后加终止液变成黄色。
颜色深浅和IHH浓度成正比。
我盯着酶标板看的时候。
有时候觉得。
这不就是做科研的颜色吗。
开始的时候什么都不是。
过程中一点点显出来。
真相
写这篇不是教你怎样一秒钟选对IHH检测试剂盒。
这种事本来就没有标准答案。
不同样本、不同仪器、预算不同。
选择完全不一样。
我只能告诉你我踩过的坑。
买之前问清楚样本是否验证过。
灵敏度数据是否真实。
供货商服务怎么样。
有没有批次稳定性文件。
这些真的比便宜几百块钱重要得多。
最后
科研嘛。
只是一群有点理想主义的人。
在那里反复校准参数、清理数据、自我怀疑、然后继续。
IHH检测试剂盒只是一个工具。
选择合不合适的标准，只有你自己知道。
有些孤独是必须独自完成的。
就像每一次实验。
就像每一次深夜站在酶标仪前面。
看见OD值终于落在标准曲线上时候的那种解脱。
够了。
我去配标准品了。
这次希望能一次跑通。
