上周实验室废了一整批细胞。
我盯着皿里那团变形的细胞，差点把培养瓶摔在地上。
## 大动物原代还得看猪
客户群里天天有人问：哪个物种的原代细胞最靠谱？
国内供应商一翻，人源细胞没几家有资质，小鼠大鼠满大街都是。
但大动物模型呢？羊、犬、猫、兔，零星几页，猪的更少。
为啥？饲养成本高，分离难度大，量产效益低。
可偏偏很多特殊项目非得用猪——没办法，解剖生理实在太像了。
只是要到这个时候，你才会发觉，能够稳定地获取到健康猪原代细胞的供应商，其实就仅仅只有那么几家而已。
## 猪原代细胞分离难在哪
他们说就一个消化分离的事儿，能有多难？
我给你算算。
剖开、剔脂肪、去筋膜、剪成大小差不多的小块。
每进行一步操作，均要做到无菌，对于器械要进行高压灭菌，还要使用含有双抗情形下的PBS反复冲洗，冲洗次数为3到5遍。
胶原酶消化，温度时间差一点都不行。
过了筛，离了心，还要差速贴壁法纯化——怕混进别的细胞。
最后还得PCR测支原体，看细胞活力。
一天忙下来，最终养出来的可能还不够做一组药筛。
## 好的源头不是批发市场里挑出来的那些
行业内喊了多少年的核心痛点：
细胞来源有限，取一次少一次；
个体差异巨大，不同批次差别明显；
传几代就老化、分化能力下降；
免疫排斥问题绕不开。
就这些，够研究踩坑踩到头皮发麻。
## 猪原代细胞能干啥，我跟你掰扯掰扯
骨骼肌成纤维细胞：研究肌肉损伤修复离不开它。
骨髓间充质干细胞，朝着骨的方向分化，朝着软骨的方向分化，朝着脂肪的方向分化，朝着肌肉的方向分化，是全能型种子细胞。
主动脉平滑肌细胞，是从幼年猪那里获取材料的，进行的是P3代以内的实验，只有表型稳定了，才会有数据可信度。
黏膜成纤维细胞，属于鼻甲部位的细胞。它充当着PCMV病毒的宿主细胞，是疫苗筛选方面经典的宿主细胞。
肝细胞、肾细胞、肺泡上皮细胞……列表能写满几页。
每个项目挑对了类型，数据才有了基础起点。
## 保质期不只是包装上的日期
冻存在液氮了就不变质了？想多了。
冻存时液氮梯度降温，DMSO浓度控制不好，细胞直接死一片。
复苏时37℃水浴快速解冻，离心去DMSO，再重悬接种。
细胞贴壁不成功、细胞出现老化现象、支原体偷偷进行污染，在做一回实验的过程中，你也许一直到得出结果的那天，才发觉使用了质量不佳的细胞。
市场上的猪原代细胞，活率低于90%的比比皆是。
供应商有几种？有的靠谱，有的……你懂的。
那天我把废掉的那批皿一个个倒掉。
同事路过问了一句：“你这批细胞哪家的？”
我没吭声。
后来我学会了在拿细胞之前，先搞清楚——
这批细胞，到底是什么猪种的？什么组织来的？传了几代？谁处理的？
你向供应商询问那些问题之际，有没有胆量将答案打印出来放置在实验报告当中呀？
反正，我不敢赌了。
好细胞的源头，才决定你实验的终点
细胞质量好不好，从来不是瓶瓶罐罐上说的算。
是你于实验台上，一回又一回进行重复，当数据无法重复得出之际，方才真相得以大白。
希望你有好运气，早点碰到那个对的源头。
