说实话，刚入这行的时候，我也被各种试剂盒搞到头大。
彼时才刚开始接手课题，老板突然抛来一句话，说“你去瞧瞧肝脂酶 ELISA 试剂盒哪个牌子是值得信赖的”，我瞬间就愣住了。何谓靠谱呢？说明书里所写的灵敏度、特异性，那些数字究竟可不可信呢？在网上搜索一番后，满眼都是广告，要不就是厂家自己写出的软文，看完后更不清楚该买哪一个了。
后来踩了无数坑，烧了不少样品，才慢慢摸出点门道。
肝脂酶ELISA试剂盒到底测什么？
简略来讲，这个东西是专门用以检测样本内肝脂酶含量的，肝脂酶此物，主要与脂代谢存在关联，从事研究代谢类课题以及肝相关功能实验的人员会常常遇到。
但问题在于，不是所有试剂盒都能测准。
我经历过最为离奇怪诞的一回，关于同一个样本，采用两个不同牌子的试剂盒去进行检测，得出的结果竟然相差了整整3倍。那时节，我差一点就将板子狠狠摔落了。随后向老前辈打探询问，人家听闻后冷冷笑了一声说道：“你所处理的那个样本是否正确无误？试剂盒所适配的样本类型到底有没有相互匹配呢？”。
一句话警醒了我，原本问题不见得是在试剂盒自身，且说不定是自己的操作流程出现了差错。
选试剂盒最怕什么？
怕假货？怕贵？怕测不出来？
实际上最害怕的是结果不稳定，今天对一个值进行测量，明天针对同一个样本再次测量，却又变成了另外一个数值，数据无法重现，论文该如何撰写，审稿人询问该怎么作出解释？
那还有一个存在问题的地方，就是说明书里所提及的适用范围。好多试剂盒上面写着适用于血清、血浆以及细胞上清，然而当你真的把细胞上清拿去进行检测的时候，或许背景会高到离谱的程度，就连标准曲线都会出现偏差。
所以当下我挑选试剂盒时，首要之事便是查看文献引用情况。对于在经过同行评审的期刊中被使用过的试剂盒所属牌子，我会将其列为优先考虑对象。并非观摩其官网自行挂出的“推荐文献”，而是要亲自去往PubMed进行搜索。
收到试剂盒后别急着拆
这个教训是我用真金白银换来的。
某次收到试剂盒，当时恰好是周末，心里想着下周再拿去做，于是就随意地把它放置到冰箱里了。结果周一的时候打开一看，发现标准品已然化冻了——原来是在运输的过程当中干冰量不足，致使东西早就已经失效了。
随后我便变得机灵起来：在收到货物之际，要先去检查包装状况，查看干冰是否依旧存在，确认试剂盒有无出现破损情况。待确认没有问题之后，方可进行签字。要是发现异常现象，需当即拍摄照片，并且立刻与厂家取得联系。
另外，不要一次性将全部试剂都进行配制。像洗液、稀释液这类物品，按照使用量来配制。要是配制过多且放置时间久了，其活性就会降低，最终结果必然不准确。
实验步骤里最容易出错的环节
不少人认为 ELISA 简便，进行加样操作，接着开展孵育，随后实施洗板，再进行显色，而后举行终止步骤，最后读取数值，如此一套流程依次完成便可。
但恰恰是这些“简单”的步骤，最容易翻车。
洗液冲洗的板子区域是极为严重的问题集中之处。冲洗方式若不正确，未能洗净，那么背景就会偏高；而若是冲洗力度过度，将已结合的物质给冲除了，信号便会微弱。我通常的做法是进行五次冲洗操作，每一次都要使得洗液在实验孔内停留三十秒时长，在将洗液倒扣拍出使其变干时，用力必须均匀，千万不要把实验板子给拍裂了。
温度这一孵育条件也是相当关键的，试剂盒是存在不同要求的，某些试剂盒对孵育温度要求为37℃，而另外一些试剂盒则要求在室温下进行孵育，千万不要凭借主观臆断行事，必须严格依照说明书来操作，我曾见到过有人为求省事将板子放置于37℃的孵育箱当中，然而其放置方式存在问题，旁边还放置了一盘正处于培养状态的细胞，最终导致板子的盖上凝结了一层雾气，进而致使最后的数据全部作废，无法使用了。
怎么判断试剂盒好不好用？
一个很简单的办法：看标准曲线的R²值。
要是R²比0.99低，那么这个试剂盒的稳定性便存在问题，另外还有看板内变异以及板间变异系数，通常规定CV%小于10%。倘若厂家连该数据都不予以提供，那基本上就可以淘汰了。
关于样本的稀释线性，再且就是，取一个高浓度的样本，进行一系列的倍比稀释操作，查看所测出来的值与理论值二者能否相匹配，若二者不相符，那就表明存在基质干扰情况，如此一来，这种试剂盒所测出来进而得出的数据其可信度便要画上一个问号了。
实在拿不准怎么办？
向同行去进行询问，或者前往实验室的群组、论坛里去进行搜索查找。总归是会有其他人曾经踩过坑的，并且也总归是会有其他人使用过觉得好用的。
我当下手头所使用的那般，乃是被一位师兄推荐引入的。他讲“此一牌子我已使用达两年之久，数据呈现出稳定态势，客服的回复亦是极为及时的”，我于是进行了一番尝试，的确是相当不错的。尽管其价格相较于杂牌而言要贵上那么一些，然而实验所需的成本并非仅仅取决于钱财，更为关键的是要看所耗费的时间。
有一个试剂盒出现问题了，得再次去购买，然后再次进行操作，这样起码会耽搁一周的时间。在这一周的时长里，对于那些正在忙于赶课题、忙于赶毕业的人而言，实在是太挥霍了。
最后说点实在的
别太迷信进口大牌，也别一棍子打死国产品牌。
我曾见识过进口试剂盒的价钱是国产的三倍之多，然而其性能却并未比国产的好出三倍。也曾目睹国产的做得比进口的还要稳定。关键的要点在于，还是得看你自身的样本体系，有没有开展过预实验以进行验证。
若具备条件，购买两至三个品牌的试剂盒，选取同一标本进行对照。查看哪一个的线性优良、重复性卓越、背景值低。耗费几百块钱开展此验证，相比于往后浪费几千块钱的样本以及几个月的时间，要划算得特别多。
脂肪方面的肝的酶的用于酶联免疫吸附测定的试剂盒这种物品，究 Root 竞而言就是一种工具。工具是否好用，必须自己进行了尝试之后才可以获知知晓懂得晓得明白。不要仅仅只去看广告，也不要仅仅只听其他人讲说叙述，自己亲自动手去操作运行一板，比任何事情任何东西都要更具优势更强大。
