其实最开始接触原代细胞株的时候，我也有点懵。
相较于那些历经不知几何代代相传的传代细胞系而言，原代细胞这一群体，可以这般描述，那就是特性使然，显得娇弱，极难照料。在培养过程中，它动不动就出现老化情形，还会莫名其妙发生变异。更令人头疼的是，有时它甚至会直接走向死亡，将难题留予科研人员。实验室里的师兄，那段时间老是反复念叨着这样一句话：“原代细胞就如同初恋一般，其美好感受是着实存在的美妙，但是所带来的折磨亦是实实在在的折磨。”。
然而，随后做了好些项目，遭遇了好多波折，才渐渐琢磨出其中滋味——此物断然无法被取代。
原代细胞株到底是什么？
简而言之，是从活体组织当中直接获取出来的细胞，以及经过培养的细胞。它未曾经历过传代系那般所谓的“人工驯化”，其基因型与体表型均相对更为贴近体内的真实状况。
就比如说呀，传代系如同动物园里饲养了三代之久的狮子，看起来是狮子的模样，然而实际上已经丧失了捕猎的能力；而原代细胞呢，它是刚从草原之上捕获回来的那一只，狂野的特性、真实的状态以及反应都与野外毫无二致，完全相同。
实验里要的就是这份真实。
为什么我的实验数据总是不对劲？
这个问题我问过自己无数次。
后来发觉，很多情形下并非实验设计存在问题，而是细胞自身就不符合要求。传代系使用时间长了，基因会发生漂变，表型会产生改变，甚至染色体数目也会因而出现变化。你采用如此这般的细胞得出的数据，怎么能够具备可靠性呢？
原代细胞株可不是这样的情况，它有着稳定的遗传背景，在短时间之内是不会出现大规模变异的，所做出的结果具备良好的重复性，在发文章时审稿人根本挑不出任何问题。
原代细胞培养的日常：崩溃与惊喜
说起来都是泪。
刚开始养原代的时候，每天都紧盯着培养箱，就如同照料婴儿那般。只要温度差稍有零点几度，便会感到紧张，一旦培养基颜色只是变黄那么一点儿，就会陷入焦虑。最为崩溃的是这种状况，有时候原本好好的细胞，睡了一觉起来竟然全都飘浮起来了。
但慢慢摸到门道之后，就会爱上这种状态。
究其缘由，原代细胞是存在“反应”的，倘若你给予其良好的条件，那么它便会长得充满活力，要是你有所疏忽，它肯定会让你知晓厉害，这般真实恳切的反馈，乃是传代系始终都无法给予的。
并且，原代细胞的分化状况愈加贴近体内，倘若你企望解析某个特定组织的功能，像肝细胞的代谢情形、血管内皮的通透性能、神经元的电活动表现那般，如果运用原代细胞所获取的结果，方才切实具备令人信服之效力。
原代细胞株的“性格”你得摸透
每种原代细胞都有自己的脾气。
若提及原代肝细胞，其贴壁的速度极为缓慢，并且格外易于“去分化”，仅仅养殖几日便会丧失功能。原代神经元则更为奇特，基本上不会进行增殖，你唯有小心翼翼地使其维持存活状态。
这些特征，乍一回瞧皆属不足。但你转变个视角思索——恰是这些“品性”，使得原代细胞愈发贴近真实的组织环境。
做完实验到后面阶段，你就会发觉，所说的好细胞，并不是那种不管怎么进行折腾都不会死亡的，而是那种能够切实反映你所研究问题的。
怎么判断自己是否需要原代细胞株？
这问题其实挺实在的。
要是你仅仅是去做蛋白表达，以及转染效率测试这般的基础实验，传代系充分能够满足需求，根本没有非得跟自身过不去的必要。
可是，要是你打算钻研组织特异性功能，或者探究药物代谢途径，又或者研究毒理机制，再有就是想开展转化医学相关工作，那么原代细胞基本算是必经的道路了。
另外存在一个关键的考量因素，那就是你所进行的实验周期情况。原代细胞在体外环境下存活的时间是存在一定限度的，通常是从几周到几个月的范围之内，各不相同。要是你的实验要求进行长期的观察，那就必须要提前对细胞批次以及实验时间线做好规划安排。
原代细胞的获取：自己分离还是买现成的？
这问题也纠结过我很久。
自行做分离操作，成本是较为低些的，然而技术所需要求却是高的，并且每一回进行分离时，细胞的质量呈现不稳定情形，批次方面差异也大。去购置一个原代细胞株，事情会比较省事，只是价格昂贵，还得寻觅到靠谱的供应商。
随后我所采取的做法是，对于关键实验采用商业化的原代细胞，以此来确保批次的一致性，而探索性实验则是自己进行细胞分离，这样做既能节省费用，还能够锻炼自身的动手能力。
肯定的是，无论你选择哪一种，都必须留意对于细胞来源的知情同意以及伦理方面切实的合规状况。这并非是搞形式主义，而是科研领域最为根本的底线哦。
写到最后，想说点大实话
原代细胞株这东西，用起来是真的累。
但它也是真的值。
那些致使你熬夜紧盯着显微镜的时日，那些鉴于细胞状态欠佳而重新开展实验的崩溃时刻，那些最终获取到漂亮数据之际的狂喜之情——全都是科研路途上最为真切的痕迹。
如果你现在正在纠结要不要用原代细胞，我的建议是：别怕麻烦。
在实验进行到最终阶段的时候，比拼的并非是设备究竟有多么先进，经费到底有多么充足，而是你对于自身所研究的问题秉持着怎样的尊重程度。心甘情愿地运用最贴近真实状态的模型去开展实验，这本身实则就是一种科研态度。
总归来讲，进行原代培养这个事情，恰似开展马拉松运动，起始之际令人痛楚，行进途中萌生放弃之念，然而当跨越到终了界限之时，所有的一切皆具备价值意义。
