讲真，刚开始接触大鼠ELISA试剂盒的时候，我也是懵的。
刚进入实验室的那个时候, 师兄递给我一本目录, 说道“你自行挑选吧”。我注视着满屏幕的缩写、种属以及灵敏度, 脑袋发出嗡嗡的响声。诸如“检测范围”、“交叉反应率”、“批间差”等等, 感觉比考研英语更具难度。
随后经历了几回踩坑, 有过样本的浪费, 也存在时间的浪费, 如此这般之后才渐渐摸索出些许窍门。
其实选试剂盒这事，没那么玄乎。
大鼠ELISA试剂盒真的越贵越好吗？
不一定。
价格昂贵自有其昂贵的缘由, 就好比某些进口品牌, 针对抗体进行的筛选的确是严谨苛刻的, 而且批次之间的稳定性也是良好的。然而存在的一个问题是——以你的实验状况而言, 真的需要达到那般程度的高精度吗?
比如说, 要是你在去进行预实验, 去摸索条件的情况之下, 或者是样本量特别大, 同时预算又非常有限的状况之中, 选用那些性价比高的国产品牌是完全能够满足需求的。我曾经见到过有人运用进口高端试剂盒去检测一项普通指标, 然而结果跟头国产的相较起来并没有什么差异, 却平白无故地多花费了两倍的资金。
所以别迷信价格，先看你的实验目的。
怎么判断一个试剂盒靠不靠谱？
这事我吃过亏。
曾有一回, 我因贪图便宜购入了一个未曾听闻过的品牌, 然而结果是标准曲线绘制得极为糟糕, 样本的OD值全部出现了漂移状况。嗣后只好重新购买了一个具备引用文献的, 数据方才得以挽回。
因此, 首要之事乃: 查看文献引用情况。倘若有一个试剂盒被多篇SCI论文使用过, 那就意味着其一至少并非是在敷衍了事的。
第二件事情是: 查看说明书。质量优良的说明书会明晰地写出抗体的来源、包被以及检测抗体的种属、稀释比例, 甚至还会给出具有代表性的标准曲线图。而那种什么内容都不进行书写的说明书, 要当机立断地予以摒弃。
做的第三件事情便是: 询问技术支撑,往那个方向进行过致电的行为,针对几个技术方面的带有疑问性质的问题,对方是否能够把它们很顺利地给解答出来,很快就能够依靠这样的方式测试出来了,要是回答得模棱两可的,很大的可能性是靠不住的呢。
样本类型不同，怎么选？
这个问题，问的人特多。
属于大鼠的血清, 还有血浆, 以及组织匀浆, 包括细胞上清等等, 这些样本类型是不一样的, 对此试剂盒的适配性同样也是不一样的。
就像血清以及血浆那样, 其包含的成分繁杂多样, 存在部分试剂盒所具备的抗体与血浆之中的抗凝剂呈现敏感状态, 进而导致检测得出的结果出现偏差。因而在进行购买之前, 要明晰看清具体说明究竟适配哪些样本。
另外存在一个容易被忽视的要点, 那就是样本稀释, 某些指标于大鼠体内的浓度是非常高的, 只有进行稀释才能够进行测量, 然而要是稀释倍数不正确的话, 那么数据就全无效了, 因此建议先期开展一次预实验, 摸索一下稀释的比例。
大鼠ELISA试剂盒的保存和操作，有啥坑？
说真的，大部分问题都出在操作上。
好比说, 试剂盒送回来之后, 没有依照说明放置在4℃或者-20℃的环境里, 而是置于常温下过了一夜, 到了第二天再去进行检测, 结果就全都糟糕透顶了。
另外还有洗板这一操作, 别妄以为洗板仅仅只是走个流程, 要是洗不洁净, 背景会高到离谱的程度, 数据根本就没办法用以使用。我尔后养成了如此的习惯, 每进行一步的洗板操作都起码要洗5次, 到了最后一次的时候要把板拍干, 且要用力地去拍, 拍在干净的纸巾上面, 一直拍到没有液滴存在为止。
此外, 还有温育的时间以及温度这方面。存在一些试剂盒规定需在37℃的环境下温育30分钟, 然而你却非要贪图简便省事而放置在室温环境中, 最终导致结合效率出现差异, 进而使得OD值无法相互对应。
国产和进口，到底选哪个？
这个问题，没有标准答案。
我的经验呈现出这样的样子, 重要的、起决定性作用导向的指标选择进口的, 而那些普通的、常见的、较为一般且规则确定的指标选择国产的。
比如说, 那种会发表高分文章, 且对数据有着格外严苛要求的实验而言, 选择进口品牌, 方可避免审稿人产生质疑。然而, 倘若进行筛选、预实验, 或者样本量极为庞大的情况, 国产的性价比着实很具优势。当前, 众多国产品牌的质量已然提升, 其中有些甚至还提供免费试用装, 你将其拿回去试用一番, 若不好用便退回去, 十分稳妥。
价格差异那么大，到底差在哪？
有可能你会瞧见, 针对同一指标的大鼠 ELISA 试剂盒, 存在有的售价为两千, 而有的售价是五千的情况。
差在哪？核心是抗体对的质量。
有的抗体对很不错, 不仅特异性强, 不会跟其他蛋白产生交错反应, 而且灵敏度颇具高度。而有的抗体较为便宜, 或许使用的是多克隆抗体, 或是抗体对的配对情况不佳, 致使背景偏高, 线性表现较差。
就是还有纯度方面以及批次的稳定性这两点。大品牌呢对每一批次都会去做质量控制, 并且将每批次间隔之間产出数据的差值控制在百分之五里面。小作坊情况就不同以往啦, 很有可能一批次和一批次之间呈现出不一样情况, 就像你这次检测得到的数据, 当你以后再去购买同一指标时, 最终可能反馈回来的结果却对不上之前的数据。
因此, 不要仅仅去看价格, 而要去看它贵得是否存在合理的缘由。存在一些品牌, 其贵体现在搞营销上, 另一些品牌, 其贵则体现在搞研发上。
买回来发现不好用，能退吗？
看商家。
某些大品牌是对退换货予以支持的, 更有甚者是会提供免费试用的。然而众多小商家呢, 一旦你把包装拆开了, 那就是不给退的了。所以在购买之前要将售后政策问明白, 最好是先拿试用装去测试一下。
通常情况下, 就是在购买之前, 我会先向技术支撑索要一份电子版的说明书, 然后认真地去看其中的操作步骤以及标准曲线。要是说明书所撰写的内容全都杂乱无章, 那么试剂盒很有可能也是不可靠的。
最后说点实在的
别把选试剂盒想得太复杂，也别太随意。
核心要点首先是, 要清晰地明确你想进行实验所指向的目, 去查看文献并进行引用, 询问关于技术方面给予以存在的支撑情况, 然后尝试去做一下之后再说。
有些坑，踩过一次就记住了。但能提前避免，总比事后补救强。
期待着你, 能够在首次尝试的时候, 便挑选到契合适用的试剂盒, 数据能够顺遂通畅, 实验能够尽早完成。
其实只要认真做，细节到位，结果不会骗人的。
