搞科研的人，大概都经历过那种“试剂荒”的时刻。
不是缺钱，是缺一颗好用的抗体。
我记忆极为深刻, 有一回进行Western blot操作, 耗费了足足两周时间, 更换了三种单抗, 然而得到的结果全都是非特异性条带。那种感受该如何形容呢……就好似你明明依照菜谱去烹饪, 每一个步骤都毫无差错, 可端到桌上的却是一股糊味。
后来同事甩给我一瓶多克隆抗体，说，“你试试这个。”
死马当活马医呗。
然后, 你猜这是怎么个情况? 有一回跑出来之后, 那条带干净到啥程度, 简直能让我去寻思寻思是不是把样品给跑错。
多克隆抗体到底是个啥？
直白来讲, 是要使得动物免疫系统自身去“批量制造”那一堆抗体的混合物。
跟单克隆抗体那种“精准打击一个靶点”的思路完全不一样。
多克隆抗体好似打霰弹枪那般, 一枪射出, 散弹会覆盖一大片区域。它可以识别抗原上面的多个不一样的位点, 故而总体而言结合能力更为强大, 信号放大效果亦更为显著。
这就带来一个很实际的好处：
它不容易漏信号。
特别是在你所进行实验的蛋白表达量处于很低的状态时, 或者当样品里面的蛋白构象发生了变化之际, 多抗往往能够稳住局面确保兜底。单抗一旦遇到稍微有点构象改变的情况就会不再识别, 然而多抗这种呈现“团伙作案”的方式, 看上去反倒更加坚固耐用。
为什么实验老手都备着一瓶多抗？
我观察到一个很有意思的现象。
实验室才开始做实验的新人, 通常特别迷信仅有的一个克隆生成的用作免疫诊断试剂的蛋白质, 感觉“纯粹”“准确”“高级”。
但干了三五年之后，他们的冰箱里一定有几瓶多抗。
为什么？
因为真实的实验世界，不是教科书。
你的样品有出现降解的可能性, 你的裂解液pH存在发生漂移的可能性, 你在转膜时存在些许不均匀的可能性……这些变量全部累积在一起, 单抗所拥有的那种“非黑即白”的性格反倒变成了短板。多抗由于抗体种类数量众多, 总会有几个能够“歪打正着”地实现结合。
这仿佛如同生活之中那些尤为特别爱较真的人, 跟任何人都难以相处融洽, 反之, 却是性格随和且能够包容各类各种小毛病缺点的人, 无论走到什么地方哪里都能够吃得开顺畅顺利。
多克隆抗体就是那个随和的老好人。
但也有坑，踩过的人都懂
不过我得说点大实话。
多抗最大的问题，就是批间差异。
你在购买第一瓶之际, 所起到的效果令人感到惊艳, 待将其用完而后去购置第二瓶之时, 嘿, 怎么这个背景竟然是如此之脏, 怎么条带的位置发生了些许的改变?
每一批次用于免疫的动物, 其个体之间存在差异, 而且免疫反应的强弱程度也不尽相同, 正因如此, 不同批次所产生的多抗, 在性能方面, 有可能相差得较为悬殊。
当时有个我的师姐, 因出现了抗体批次更换的情况, 导致持续三个月的实验所得结果, 全部需要再次进行验证, 她那时愤怒到把装有抗体的瓶子, 直接丢进了垃圾桶当中。
所以如果你决定用多抗，有个建议非常实用：
一次多囤几瓶。
特别是你手上那一批呈现出恰到好处效果的时刻, 要迅速去核查货号, 查看是否存在现货, 有多少瓶能够买下就买下多少瓶。不要等到使用耗尽之后才去补充货物, 否则你极有可能从仿若天堂的境地跌入犹如地狱的状况之中。
这些场景，多抗是首选
说几个我身边的真实情况吧。
做免疫组化（IHC）之际, 多抗相对单抗而言常常更具好用性。这是由于组织切片之内抗原的暴露程度并非整齐划一, 而多抗具备那种“广谱识别”的特性, 所以反倒更易于给出均匀的染色表现。
展开ELISA操作之际, 特别是针对夹心法而言, 多抗鉴于其具备众多结合位点, 故而信号放大所呈现的效果尤为显著。
还有进行免疫共沉淀（Co-IP）操作, 多克隆抗体能够识别蛋白质的不同构象以及修饰状态, 其捕获效率常常会更高。
即便如此, 要是你所从事的是流式细胞技术方面的工作, 又或者是存在需要去辨别极为细微的蛋白修饰位点这样的情况, 那么单克隆抗体或许会更为适宜。并不存在绝对的“谁优谁劣”这种状况, 仅仅存在“谁更契合实际需求”这样的情形。
踩过的坑，也是经验
说实话，我刚开始做实验那会儿，对多抗是有偏见的。
总觉得它“不纯粹”，不像单抗那么“科学”。
而后被现实予以了教育, 那便是实验的成功率远比其他任何事物都更具重要性。你即便再怎么“科学”, 要是无法得出数据, 在组会之际依旧会遭受责骂。然而那些并非“纯粹”的事物, 却助力你挡住了各类实验当中的意外风险。
现如今, 我的冰箱里头, 单抗存在以及多抗同样存在。依据不一样的实验目的, 进行灵活的切换。
有时候我还挺感慨的——做科研和做人，有时候道理是相通的。
容易累且容易翻车的, 是那些太过较真的人, 学会包容变量、接受不完美, 如此反而能够走得更远。
小结一下
存在这么一种东西, 它叫做多克隆抗体, 它并非毫无瑕疵, 然而它的确助力了众多的人去解决实际出现的问题。
要是你在做实验时, 老是碰到信号微弱的情况, 又屡屡出现非特异性条带众多的状况, 或者遭遇抗原构象不稳定的问题, 那么不妨尝试一下多抗。它不见得是最为“正确”的值择, 然而极有可能是最为“有效”的选择。
毕竟, 进行实验的人最为明晰, 任何天花乱坠的理论, 都比不上一块干净且漂亮的膜来得切实。
